Anticorps polyclonal de lapin anti-collagène I/COL1A1 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P02452

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du collagène I/COL1A1

• La chaîne alpha-1(I) du collagène (COL1A1) est un composant majeur du collagène de type I, le collagène fibrillaire le plus abondant chez les vertébrés. Elle appartient à la famille des collagènes de groupe I.
• Le collagène de type I est un hétérotrimère constitué de deux chaînes alpha-1(I) et d’une chaîne alpha-2(I), formant le principal élément structural de la matrice extracellulaire (MEC) des tissus conjonctifs.
• La protéine est sécrétée dans l’espace extracellulaire et déposée dans la MEC, où elle subit d’importantes modifications post-traductionnelles, notamment l’hydroxylation, la glycosylation et la formation de ponts disulfure, afin de s’assembler en fibrilles matures.
• La distribution tissulaire se situe principalement dans les tendons, les ligaments et les os ; dans l’os, les fibrilles de collagène sont minéralisées avec de l’hydroxyapatite de calcium, ce qui leur confère une résistance à la traction et une intégrité structurelle.
• L’épissage alternatif et le traitement protéolytique génèrent plusieurs isoformes ; les mutations de COL1A1 sont associées à des troubles du tissu conjonctif tels que l’ostéogenèse imparfaite, le syndrome d’Ehlers-Danlos et certaines formes de nanisme.
• Les caractéristiques annotées supplémentaires comprennent la liaison aux métaux (calcium), des résidus phosphorylés et une modification par un acide carboxylique pyrrolidone à l’extrémité N-terminale, reflétant la régulation complexe de sa maturation et de sa fonction.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant aux résidus 1151–1250 de COL1A1 humain (NP_000079.2), dans une région proche de l’extrémité C-terminale. Cette conception peut favoriser la détection du procollagène pleine longueur ou des chaînes de collagène matures selon le traitement de l’échantillon.
• Pour le Western blot, une bande autour de 139 kDa est attendue ; les conditions réductrices peuvent faciliter la résolution des monomères de collagène, tandis que les conditions non réductrices préservent les oligomères d’ordre supérieur. Dans les lysats tissulaires, envisager un prétraitement par collagénase afin de confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et en immunohistochimie (IHC-P), le collagène est principalement extracellulaire ; une perméabilisation adéquate (par exemple avec du Triton X-100) et une récupération antigénique (pour les coupes en paraffine) peuvent être nécessaires. Le double marquage avec des marqueurs de la MEC ou la détection dans des coupes d’os décalcifié peuvent fournir une validation supplémentaire.
• Pour les applications ELISA, des formats directs ou sandwich peuvent être étudiés. Le revêtement par le peptide ou la capture par un second anticorps peut améliorer la sensibilité lors du travail avec des matrices biologiques complexes telles que le sérum ou les extraits tissulaires.

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