Anticorps polyclonal anti-COL9A1 pour WB et ELISA - P20849

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la COL9A1

• Le gène COL9A1 code pour la chaîne α1 du collagène de type IX, un collagène associé aux fibrilles à triples hélices interrompues (FACIT) qui est un composant structurel du cartilage hyalin et du vitré de l'œil.
• Les molécules de collagène de type IX sont des hétérotrimères composés des chaînes α1(IX), α2(IX) et α3(IX), et ils s'associent aux fibrilles de collagène de type II, contribuant vraisemblablement à l'intégrité et à l'organisation de la matrice extracellulaire.
• COL9A1 est soumise à un épissage alternatif et contient plusieurs domaines, incluant des régions collagéniques et non collagéniques, essentiels à son interaction avec d'autres composants de la matrice.
• La protéine est sécrétée et localisée dans l'espace extracellulaire et la matrice, où elle participe à l'assemblage et à la stabilisation des structures du cartilage et du vitré.
• Les modifications post-traductionnelles telles que l'hydroxylation, la glycosylation et la formation de ponts disulfures sont essentielles à sa stabilité et à sa fonction.
• Les mutations de COL9A1 sont associées à des dysplasies squelettiques et des maladies du tissu conjonctif, notamment le syndrome de Stickler (caractérisé par des anomalies oculaires, auditives et articulaires) et la dysplasie épiphysaire multiple, ce qui souligne son importance clinique.
• La protéine contient un peptide signal et des sites de liaison au zinc, et sa forme mature est une glycoprotéine sécrétée.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps polyclonal est une protéine recombinante correspondant aux acides aminés 20 à 270 de la COL9A1 humaine, couvrant une partie du domaine non collagénique N-terminal, ce qui peut conférer une spécificité pour la chaîne α1(IX).
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 92 kDa est attendue pour la COL9A1 entière dans des échantillons de cartilage ou de vitré humains ; cependant, du fait de l'épissage alternatif et des modifications post-traductionnelles, des bandes supplémentaires ou des décalages de poids moléculaire peuvent être observés.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec la COL9A1 de rat, ce qui suggère qu'il peut être utilisé sur des modèles de rat ; validez-le sur des lysats de tissus pertinents ou des systèmes recombinants pour confirmer sa réactivité.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser la COL9A1 recombinante purifiée comme antigène de revêtement ou étalon de capture, et réalisez une optimisation appropriée de la dilution de l'anticorps et des conditions de détection.
• incluez toujours des contrôles positifs (extraits de cartilage, protéine recombinante) et négatifs appropriés pour confirmer la spécificité et minimiser le bruit de fond.

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