Anticorps polyclonal de lapin anti-COL5A1 pour WB et ELISA - P20908

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du collagène alpha-1(V) (COL5A1)

• La chaîne alpha-1(V) du collagène, codée par COL5A1, est un constituant du collagène de type V, un collagène fibrillaire minoritaire présent dans presque tous les tissus conjonctifs. L’épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• Le collagène de type V s’assemble conjointement avec le collagène de type I afin de réguler le diamètre et l’organisation des fibrilles dans la matrice extracellulaire (MEC).
• Il appartient à la famille des collagènes de groupe I, qui comprend des collagènes formant des fibrilles essentiels à l’intégrité des tissus et à leurs propriétés biomécaniques.
• COL5A1 se lie directement à l’ADN, au sulfate d’héparane, à la thrombospondine, à l’héparine et à l’insuline, ce qui suggère des rôles dans les interactions cellule-matrice et la signalisation.
• La protéine est sécrétée et localisée dans l’espace extracellulaire et la matrice extracellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’hydroxylation de la proline, l’hydroxylation de la lysine, la sulfatation et la formation de ponts disulfure, essentielles à la stabilité de la triple hélice.
• Les mutations de COL5A1 sont associées au syndrome d’Ehlers-Danlos (type classique), caractérisé par une peau fragile et une hypermobilité articulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région centrale (aa 300-400) de COL5A1 humain. Lors de l’utilisation de cet anticorps en WB, il convient d’envisager des conditions dénaturantes et réductrices afin de faciliter la séparation de la grande protéine d’environ 184 kDa.
• Pour l’ELISA, validez l’anticorps avec un antigène recombinant ou un peptide immobilisé afin de garantir une liaison spécifique.
• Compte tenu de sa reconnaissance de COL5A1 humain et murin, les lysats d’échantillons appropriés comprennent les fibroblastes, les tissus conjonctifs et les préparations riches en MEC.
• Les protéines de collagène étant fortement réticulées, la préparation des échantillons peut nécessiter une homogénéisation prolongée et une digestion enzymatique (par exemple avec de la pepsine) afin d’obtenir une détection optimale.

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