Anticorps polyclonal anti-COL4A4 pour WB et ELISA - P53420

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de COL4A4

• La chaîne alpha-4(IV) du collagène, codée par le gène COL4A4, est un composant structurel majeur du collagène de type IV, qui forme un réseau en « grillage » dans les membranes basales avec les laminines, les protéoglycanes et l’entactine/nidogène.
• Les hétérotrimères de collagène de type IV sont constitués de chaînes alpha ; la chaîne alpha-4(IV) se trouve généralement associée aux chaînes alpha-3(IV) et alpha-5(IV), formant des réseaux essentiels dans les membranes basales spécialisées.
• La protéine est sécrétée dans la matrice extracellulaire et constitue un élément essentiel des membranes basales glomérulaires (MBG), jouant un rôle structurel critique dans la filtration rénale.
• La distribution tissulaire est la plus élevée dans le rein, la calvaria, la neuro-rétine et le muscle cardiaque ; l’expression est plus faible dans le cerveau, le poumon et le thymus ; elle n’est pas détectée dans le foie, la peau, l’iléon, le pancréas ou la glande surrénale (au niveau protéique).
• Dans l’œil, COL4A4 est exprimée dans la membrane de Bruch, la membrane limitante interne, les couches rétiniennes et autour des vaisseaux sanguins, contribuant à l’intégrité des membranes basales oculaires.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’hydroxylation des résidus de proline et de lysine, la formation de ponts disulfure et la glycosylation, essentielles à la stabilité et à la fonction du collagène.
• Les mutations de COL4A4 sont associées au syndrome d’Alport, une maladie génétique caractérisée par une atteinte rénale progressive, une perte auditive et des anomalies oculaires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond à une région spécifique (aa 1573-1690) de COL4A4 humaine ; il convient de tenir compte du fait que l’anticorps peut reconnaître un épitope linéaire au sein de ce domaine et ne pas détecter les isoformes qui en sont dépourvues.
• Pour le Western blot (WB), une bande principale d’environ 164 kDa est attendue dans les lysats de tissus rénaux ou rétiniens humains ; des bandes supplémentaires peuvent refléter des modifications post-traductionnelles ou des produits de dégradation.
• Pour l’ELISA, optimisez la concentration de revêtement et la dilution de l’anticorps en utilisant un protocole indirect standard avec la protéine COL4A4 recombinante ou des extraits tissulaires ; incluez des contrôles négatifs appropriés.
• Validez la réactivité croisée avec les autres membres de la famille des collagènes si nécessaire, car les anticorps polyclonaux peuvent présenter une réactivité envers des domaines collagéniques conservés.

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