Anticorps polyclonal anti-COL11A1 pour WB, IHC-P, ELISA - P12107

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de COL11A1

• La chaîne alpha-1(XI) du collagène est un composant du collagène de type XI, un collagène fibrillaire minoritaire essentiel à l'intégrité structurelle de la matrice extracellulaire du cartilage.
• Elle joue un rôle important dans la fibrillogenèse en contrôlant la croissance latérale des fibrilles de collagène II, régulant ainsi leur diamètre.
• Elle est localisée au niveau subcellulaire dans l'espace et la matrice extracellulaires sécrétés, ce qui est cohérent avec son rôle dans l'architecture tissulaire.
• Spécificité tissulaire : fortement exprimée dans le cartilage, le placenta et certaines lignées cellulaires tumorales ou transformées par des virus. Les isoformes utilisant l'exon IIA ou IIB sont prédominantes dans le cartilage, tandis que les isoformes utilisant uniquement l'exon IIB se trouvent dans les tendons.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'hydroxylation des résidus de proline et de lysine, la glycosylation et la formation de ponts disulfure, qui sont essentielles à la stabilité de la triple hélice et à l'assemblage supramoléculaire.
• Elle contient des répétitions collagéniques (Gly-X-Y) et des domaines non collagéniques, l'épissage alternatif générant plusieurs isoformes qui ajustent finement les interactions avec la matrice.
• Les variants génétiques de COL11A1 sont associés au syndrome de Stickler, au syndrome de Marshall et à la perte auditive non syndromique, soulignant son rôle dans le développement oculaire, auditif et squelettique.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 260 à 430 dans la région en triple hélice, conservée entre les isoformes ; la nature polyclonale de l'anticorps peut permettre de reconnaître les variants de pleine longueur ainsi que les variants issus de l'épissage.
• Pour le Western blot, envisagez un système de gel réducteur ou non réducteur, car les ponts disulfure des domaines non collagéniques peuvent affecter la migration ; le poids moléculaire prédit est d'environ 181 kDa, mais la migration réelle peut différer en raison des modifications post-traductionnelles.
• En immunohistochimie (IHC-P), les méthodes de démasquage antigénique telles que la digestion enzymatique (par exemple avec de la pepsine) ou le démasquage induit par la chaleur peuvent améliorer la détection des épitopes du collagène dans les coupes de cartilage incluses en paraffine.
• Pour l'ELISA, il est recommandé d'effectuer au préalable des titrages en damier avec du COL11A1 recombinant ou des extraits tissulaires afin d'établir les conditions optimales de revêtement et de détection.
• Lors de l'utilisation d'échantillons de rongeurs, validez initialement la réactivité croisée en raison des différences potentielles dans les profils d'expression des isoformes entre les tissus humains, murins et de rat.

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