Anticorps polyclonal de lapin anti-facteur III de la coagulation/facteur tissulaire pour WB, IF/ICC, ELISA - P13726

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du facteur III de la coagulation/facteur tissulaire

• Le facteur tissulaire (TF), également appelé facteur III de la coagulation ou thromboplastine, est une glycoprotéine transmembranaire qui constitue l’initiateur principal de la voie extrinsèque de la coagulation sanguine.
• Le TF forme un complexe de haute affinité avec le facteur VII circulant (FVII) ou sa forme activée (FVIIa) ; le complexe TF:FVIIa active par protéolyse le facteur IX en IXa et le facteur X en Xa, ce qui entraîne la génération de thrombine et la formation d’un caillot de fibrine.
• Codé par le gène F3, le TF est exprimé sous forme de protéine liée à la membrane, dotée d’un grand domaine extracellulaire, d’une unique hélice transmembranaire et d’une courte queue cytoplasmique ; l’épissage alternatif peut générer des isoformes solubles.
• La protéine est principalement localisée au niveau de la membrane plasmique, mais une forme sécrétée a également été détectée, ce qui concorde avec son rôle dans l’assemblage en surface cellulaire des complexes de coagulation.
• L’expression spécifique des tissus est maximale dans des tissus tels que le poumon, le placenta et le pancréas, où elle contribue probablement à la protection hémostatique et à la formation rapide de caillots en cas de lésion vasculaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l’azote, la formation de ponts disulfure et la palmitoylation, qui contribuent toutes au repliement correct, à la stabilité et à l’ancrage membranaire.
• Les mots-clés d’UniProt soulignent son implication dans la coagulation sanguine et l’hémostase, ainsi que ses caractéristiques structurales de lipoprotéine ancrée à la membrane.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 120 à 251 du TF humain, correspondant à une partie du domaine extracellulaire ; cette région devrait reconnaître à la fois le TF membranaire complet et les éventuels fragments solubles libérés.
• Pour le Western blot, une bande compatible avec le poids moléculaire prédit de 33 kDa peut être observée ; il est conseillé d’utiliser des conditions réductrices et non réductrices afin d’évaluer les complexes liés par des ponts disulfure.
• En immunofluorescence/immunocyt؟chimie, le TF devrait être présent au niveau de la membrane plasmique ; une perméabilisation appropriée peut être nécessaire pour la coloration intracellulaire de la protéine nouvellement synthétisée dans la voie de sécrétion.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec le TF de souris et de rat ; une validation dans les espèces et les types de tissus concernés (par exemple, le poumon et le placenta) est recommandée pour confirmer la détection.
• Pour les applications ELISA, son utilisation comme anticorps de capture ou de détection peut être étudiée ; les dilutions optimales doivent être déterminées empiriquement à l’aide d’un antigène purifié ou d’un échantillon positif connu.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être vérifiée pour les essais quantitatifs critiques.

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