Anticorps polyclonal anti-Clusterin pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P10909

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Clusterine

• La Clusterine (apolipoprotéine J, TRPM-2, SGP-2) est une glycoprotéine multifonctionnelle codée par le gène CLU ; elle existe sous formes sécrétée et intracellulaire en raison de l'épissage alternatif et du traitement post-traductionnel.
• En tant que chaperonne extracellulaire, la clusterine empêche l'agrégation des protéines non natives et dénaturées par le stress, inhibe la formation de fibrilles amyloïdes et maintient les protéines partiellement dépliées pour leur repliement par d'autres chaperonnes de manière indépendante de l'ATP. Références connexes : PMID:11123922, PMID:19535339, PMID:12176985, PMID:17260971, PMID:12047389, PMID:17407782, PMID:17412999
• La liaison de la clusterine aux récepteurs de la surface cellulaire déclenche l'internalisation et la dégradation lysosomale/protéasomale du complexe chaperonne-client. Références connexes : PMID:21505792
• Elle protège les cellules de la cytolyse médiée par le complément en inhibant l'assemblage du complexe d'attaque membranaire (MAC) par la prévention de la polymérisation de C9. Références connexes : PMID:2780565, PMID:1903064, PMID:2601725
• La clusterine intracellulaire interagit avec les ligases E3 SCF pour promouvoir l'ubiquitination et la dégradation protéasomale de cibles telles que COMMD1 et IKBKB, et module l'activité transcriptionnelle de NF-κB. Références connexes : PMID:20068069, PMID:12882985
• Une forme mitochondriale supprime la libération de cytochrome c dépendante de BAX et stabilise l'intégrité de la membrane mitochondriale pour inhiber l'apoptose. Références connexes : PMID:16113678, PMID:17689225, PMID:22689054
• La localisation subcellulaire comprend la sécrétion dans les fluides biologiques, ainsi que la présence dans le cytoplasme, le noyau, les mitochondries, le réticulum endoplasmique et les vésicules cytoplasmiques.
• La clusterine est exprimée de manière ubiquitaire avec des niveaux élevés dans le cerveau, les testicules, l'ovaire, le foie et le pancréas ; détectée dans le plasma sanguin, le liquide céphalo-rachidien, le lait, le plasma séminal et la muqueuse colique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• En raison de la nature polyclonale et de l'utilisation d'un immunogène recombinant, cet anticorps est censé détecter à la fois les formes précurseur et mature de la clusterine ; incluez des témoins appropriés et des marqueurs de poids moléculaire.
• Pour le Western blot, l'optimisation du blocage et de la dilution de l'anticorps est recommandée ; envisagez de faire fonctionner des SDS-PAGE réductrices et non réductrices en raison de la présence de ponts disulfure dans la clusterine.
• En immunohistochimie et immunofluorescence, validez avec des échantillons de tissus positifs et négatifs connus ; la récupération de l'antigène peut améliorer la détection dans les sections incluses en paraffine et fixées au formol.
• Comme la clusterine est une glycoprotéine sécrétée, assurez-vous de bien laver pour réduire le bruit de fond élevé dans les échantillons contenant du sérum.
• La réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat permet une utilisation sur des modèles précliniques courants ; cependant, vérifiez la conservation de l'épitope pour les comparaisons quantitatives.
• Titrez toujours l'anticorps dans votre système d'essai spécifique pour déterminer la dilution de travail optimale.

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