Anticorps Polyclonal Anti-CLEC4D pour WB, IF-P, ELISA - Q8WXI8

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CLEC4D

• Aussi connu sous le nom de Dectin-3, CD368 et CLECSF8, le CLEC4D est un membre de la famille des lectines de type C qui fonctionne comme un récepteur de reconnaissance de motifs (PRR) dans le système immunitaire inné.
• Le CLEC4D reconnaît les motifs moléculaires associés aux dommages (DAMP) et les motifs moléculaires associés aux pathogènes (PAMP) provenant de bactéries et de champignons, y compris les α-mannanes sur les hyphes de Candida albicans et le tréhalose 6,6'-dimycolate (TDM) mycobactérien. Références connexes : PMID:23602766 PMID:23911656
• Lors de la liaison du ligand, le CLEC4D forme probablement un complexe avec la chaîne gamma du récepteur Fc (FCER1G) via le CLEC4E (Mincle), conduisant à la phosphorylation du motif ITAM, l'activation de SYK-CARD9-NF-kB, et la maturation ultérieure des cellules présentatrices d'antigène avec induction des réponses T-helper 1 et 17. Références connexes : PMID:23602766 PMID:23911656
• Le CLEC4D agit comme un récepteur endocytaire qui peut faciliter la capture d'antigènes sur les sites d'infection pour leur élimination ou pour leur traitement et leur présentation aux cellules T. Références connexes : PMID:14971047
• À l'échelle subcellulaire, le CLEC4D se localise à la membrane cellulaire en tant que protéine transmembranaire avec une seule hélice d'ancrage de signal.
• L'expression tissulaire est prédominante dans les monocytes et les macrophages, et peut être régulée à la hausse par des cytokines telles que l'IL-6, l'IL-10, le TNF et l'IFN-gamma.
• Les principales modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfures, contribuant à sa stabilité structurelle et ses propriétés de liaison aux ligands.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 39 à 215 du CLEC4D humain (NP_525126.2) ; ainsi, l'anticorps polyclonal peut reconnaître le domaine de liaison extracellulaire au ligand et potentiellement la région de tige. Considérez que la glycosylation pourrait influencer l'accessibilité de l'épitope.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 25 kDa, mais les formes glycosylées peuvent migrer plus haut. Utilisez des témoins positifs appropriés tels que des cellules THP-1 stimulées avec des cytokines (par exemple, TNF ou IFN-gamma) pour améliorer l'expression du CLEC4D.
• En immunofluorescence (IF-P), on s'attend à ce que l'anticorps détecte le CLEC4D localisé à la membrane. Une perméabilisation est requise si l'épitope est intracellulaire ; sinon, le marquage de surface sur des cellules vivantes non fixées peut être évalué.
• Pour l'ELISA, assurez-vous que la protéine recombinante ou l'antigène natif est correctement immobilisé et tenez compte de la réactivité croisée avec les homologues de souris et de rat lors de la conception des tests.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être surveillée, et la spécificité peut être vérifiée à l'aide d'échantillons avec knockout ou knockdown de CLEC4D.

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