Anticorps monoclonal de lapin contre la Caspase-8 clivée (Asp384) pour WB, ELISA - Q14790

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Caspase-8

• La Caspase-8 est une thiol protéase qui agit comme interrupteur moléculaire pour l'apoptose, la nécroptose et la pyroptose, et elle est essentielle pour prévenir les dommages tissulaires au cours du développement et à l'âge adulte. Références associées : PMID:23516580 PMID:35338844 PMID:35446120
• En tant que caspase initiatrice, elle médie l'apoptose extrinsèque en formant le complexe de signalisation induisant la mort (DISC) après activation du FAS/CD95 ou du TNFRSF1A, ce qui conduit au clivage et à l'activation des caspases effectrices CASP3, CASP6, CASP7 et autres. Références associées : PMID:8681376 PMID:8681377 PMID:9184224 PMID:8962078 PMID:9006941 PMID:16916640
• Plusieurs isoformes existent : l'isoforme 1 (pleine longueur), l'isoforme 5 et l'isoforme 7 sont largement exprimées ; les isoformes dépourvues de site catalytique agissent comme inhibiteurs de la cascade des caspases. Références associées : PMID:12010809
• La protéine se localise dans le cytoplasme, le noyau et les projections cellulaires telles que les lamellipodes, et elle subit une phosphorylation sur la Tyr-380 pour promouvoir la migration cellulaire indépendamment de son activité protéasique. Références associées : PMID:18216014 PMID:27109099
• La Caspase-8 régule négativement la nécroptose en clivant RIPK1 sur l'Asp-324, limitant ainsi l'activité kinase et les réponses inflammatoires. Références associées : PMID:31827280 PMID:31827281
• Elle initie également la pyroptose en clivant la gasdermine C et la gasdermine D, et participe à l'immunité innée en inactivant N4BP1 en aval de TLR3/4. Références associées : PMID:32929201 PMID:34012073
• L'expression la plus élevée est observée dans les leucocytes du sang périphérique, la rate, le thymus et le foie, avec des niveaux plus faibles dans le cerveau, le testicule et le muscle squelettique.
• Les mots-clés incluent : épissage alternatif, zymogène, thiol protéase, variant pathologique et interaction hôte-virus.

Conseils expérimentaux et indications techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 371–470 de la Caspase-8 humaine (NP_203519.1), qui couvre la région de la grande sous-unité après l'autoclivage au niveau de l'Asp384 ; l'anticorps est donc spécifique de la forme clivée et activée.
• Pour le Western blot, le pro-enzyme migre à environ 55 kDa, tandis que la grande sous-unité clivée apparaît typiquement autour de 43–45 kDa. Il est recommandé d'inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des cellules traitées avec des inducteurs d'apoptose) pour vérifier l'identité des bandes.
• L'optimisation de l'ELISA peut nécessiter la titration de la concentration en anticorps et une sélection rigoureuse des agents de blocage pour réduire le bruit de fond ; envisagez d'utiliser la protéine ou le peptide recombinant de Caspase-8 comme étalon.
• La réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été déterminée ; validez-la dans le système d'échantillon concerné si vous envisagez des applications non humaines.

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