Anticorps monoclonal de lapin anti-caspase-1 clivée p20 pour WB, ELISA - P29466

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Caspase-1

• La caspase-1 est une thiol protéase appartenant à la famille des caspases, codée par le gène CASP1 (également connu sous le nom IL1BC, ICE). Elle est synthétisée sous forme de zymogène inactif (p45) qui est traité par protéolyse en sous-unités actives p20 et p10.
• Elle joue un rôle central dans les réponses inflammatoires en clivant les formes précurseurs de l'interleukine-1 bêta (pro-IL1B) et de l'interleukine-18 (pro-IL18) en leurs cytokines matures biologiquement actives, après l'assemblage des complexes de l'inflammasome. Références associées : PMID:15326478, PMID:15498465, PMID:1574116
• De plus, la caspase-1 initie la pyroptose, une mort cellulaire programmée lytique, en clivant la Gasdermine-D (GSDMD), générant un fragment N-terminal qui forme des pores membranaires. Références associées : PMID:26375003, PMID:32051255, PMID:32109412, PMID:32553275
• Pendant une infection bactérienne, la caspase-1 clive et active la caspase-7 (CASP7), contribuant à la réparation de la membrane plasmique. Références associées : PMID:22464733
• Dans l'immunité antivirale, la caspase-1 contrôle les réponses induites par les virus à ADN en clivant et inactivant la cyclique GMP-AMP synthase (CGAS). Références associées : PMID:28314590
• La localisation subcellulaire inclut le cytoplasme et la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans le traitement des cytokines et l'exécution de la pyroptose.
• L'expression tissulaire est large, avec des niveaux plus élevés dans la rate et le poumon, et des quantités détectables dans le foie, le cœur, l'intestin grêle, le côlon, le thymus, la prostate, le muscle squelettique, les leucocytes du sang périphérique, le rein et le testicule ; l'expression est absente dans le cerveau.
• La protéine est soumise à l'épissage alternatif et à la formation de liaisons isopeptidiques, et son activation implique un traitement autoproteolytique intermoléculaire ; elle appartient à la famille des peptidases C14A.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène de cet anticorps monoclonal est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 200 à 300 de la sous-unité p20 de la caspase-1 humaine. Cette région est prédite comme accessible dans la forme clivée et active de l'enzyme.
• Pour l'analyse par Western blot (WB), préparez les lysats cellulaires ou tissulaires dans des conditions réductrices. Envisagez d'utiliser des inducteurs connus de l'activation de la caspase-1 (par exemple, les activateurs de l'inflammasome NLRP3 comme la nigéricine ou l'ATP) pour observer le fragment p20 clivé. Une bande d'environ 20 kDa est attendue aux côtés de potentielles formes pro-precurseurs pleine longueur ou intermédiaires.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection de la caspase-1 clivée p20 dans le sérum humain, le plasma ou les surnageants de culture cellulaire ; la dilution optimale et l'appariement doivent être déterminés de manière empirique.
• Aucune réaction croisée avec d'autres espèces n'a été rapportée ; validez l'anticorps dans les systèmes d'échantillons concernés si des espèces autres que l'humain sont ciblées.
• Compte tenu des multiples poids protéiques rapportés (10/29/35/42/45 kDa), ceux-ci représentent probablement différents intermédiaires de clivage et isoformes ; confirmez l'identité des bandes détectées à l'aide de contrôles appropriés (par exemple, échantillons non traités vs échantillons activés).

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