Anticorps polyclonal anti-Claudine 6 pour WB et ELISA - P56747

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Claudine 6

• La Claudine-6 (CLDN6) est un membre de la famille des claudines, protéines des jonctions serrées, caractérisée par quatre domaines transmembranaires et un rôle essentiel dans le maintien de l’intégrité de la barrière épithéliale et endothéliale.
• Elle agit comme composant clé de l’oblitération spécifique des jonctions serrées de l’espace intercellulaire, régulant la perméabilité paracellulaire et la polarité cellulaire.
• Elle constitue le récepteur cellulaire de l’hôte pour l’entrée du virus de l’hépatite C (VHC) dans les cellules hépatiques, facilitant l’infection virale (infection microbienne).
• Localisation subcellulaire : Principalement située au niveau des jonctions serrées de la membrane cellulaire ; également présente dans la fraction membranaire cellulaire.
• Spécificité tissulaire : Exprimée majoritairement dans le foie, les cellules mononucléées du sang périphérique et les lignées cellulaires d’hépatocarcinome ; ce qui confirme son rôle dans la physiologie et la pathologie hépatiques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation (phosphoprotéine), qui peut réguler son assemblage jonctionnel et sa fonction.
• Elle appartient au jeu de données d’identification en protéomique et est annotée comme composant du protéome de référence, ce qui témoigne de la bonne caractérisation de son expression.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique dérivé de la région des acides aminés 121 à 220 de la Claudine 6 humaine, qui correspond à une région de la boucle intracellulaire ; cette région est conservée chez l’humain, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d’environ 23 kDa ; on s’attend à obtenir une bande entre 20 et 25 kDa dans des conditions réductrices standard. Il est recommandé d’utiliser des lysats de tissu hépatique ou de lignées cellulaires d’hépatome (par exemple HepG2) comme contrôles positifs.
• Pour l’ELISA, l’anticorps peut être utilisé dans des formats indirects ou sandwich ; une validation contre la protéine recombinante de Claudine 6 ou le peptide est recommandée. Des expériences de titrage peuvent être nécessaires pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.
• L’anticorps étant polyclonal, une variabilité d’un lot à l’autre peut survenir ; incluez des contrôles négatifs appropriés (par exemple des échantillons avec knock-down ou knock-out) pour confirmer la spécificité.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet de réaliser des études translationnelles utilisant des modèles hépatiques de rongeurs ; cependant, les niveaux d’expression peuvent différer, des expériences pilotes sont donc conseillées.

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