Anticorps monoclonal de lapin anti-CKM/CKB pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P06732

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la créatine kinase de type M (CKM)

• La CKM (créatine kinase de type M), également appelée M-CK ou CPK-M, est une enzyme clé du métabolisme énergétique cellulaire (UniProt : P06732).
• Elle catalyse de manière réversible le transfert d’un groupe phosphate entre l’ATP et la créatine phosphate, maintenant les niveaux d’ATP dans les tissus soumis à des besoins énergétiques élevés et fluctuants, tels que les muscles squelettiques, le cœur et le cerveau.
• La CKM appartient à la famille des créatine kinases, qui comprend des isoformes cytosoliques et mitochondriales, chacune présentant une distribution spécifique selon les tissus.
• La protéine est principalement localisée dans le cytoplasme, où elle facilite la mise en réserve et le transport rapides de l’énergie.
• La CKM est une phosphoprotéine soumise à des modifications post-traductionnelles susceptibles de réguler son activité et sa localisation subcellulaire.
• Les mots-clés d’UniProt mettent en évidence ses rôles dans la liaison à l’ATP, la liaison aux nucléotides, l’activité kinase et la signalisation des phosphoprotéines.
• Le poids moléculaire canonique de la CKM est d’environ 43 kDa, ce qui est cohérent avec la conception de l’immunogène.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 3 à 381 de la CKM humaine (NP_001815.2), couvrant presque toute la longueur de la protéine, ce qui suggère que l’anticorps reconnaît la conformation native.
• Pour le Western blot, une dilution initiale de 1:1000 est souvent appropriée, mais une optimisation est recommandée en fonction du type d’échantillon et du système de détection utilisé.
• En immunofluorescence (IF-P), une perméabilisation avec 0,1 % de Triton X-100 est généralement compatible ; les échantillons fixés peuvent bénéficier d’une optimisation de la récupération antigénique.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P), une récupération des épitopes induite par la chaleur dans un tampon citrate (pH 6,0) peut être testée ; la dilution de l’anticorps doit être déterminée de manière empirique.
• Comme indiqué, l’anticorps présente une réactivité croisée avec la CKM de souris et de rat, ce qui le rend adapté aux études sur des modèles de rongeurs.
• Incluez toujours des témoins positifs et négatifs appropriés (par exemple, des lysats de tissus riches en CKM et des échantillons knockout/knockdown) afin de confirmer la spécificité.

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