Anticorps polyclonal de lapin anti-CKAP5 pour WB, IP, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q14008

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CKAP5

• CKAP5 (Protéine associée au cytosquelette 5), également connu sous le nom de ch-TOG (Protéine du gène surexprimé dans les tumeurs coliques et hépatiques), est une grande protéine associée aux microtubules codée par le gène CKAP5 (GeneID : 9793) avec un poids moléculaire prédit d'environ 225 kDa.
• Il agit comme une polymérase processive de microtubules, se liant aux extrémités positives des microtubules et favorisant la nucléation et l'élongation des microtubules cytoplasmiques.
• CKAP5 joue un rôle critique dans l'assemblage du fuseau mitotique en organisant les pôles du fuseau et en protégeant les microtubules kinétochoriens de la dépolymérisation.
• Il est un composant du complexe TACC3/ch-TOG/clathrine, qui stabilise les fibres kinétochoriennes du fuseau mitotique en agissant comme un pont inter-microtubules. Références associées : PMID:23532825
• CKAP5 renforce la force des attaches microtubules-pointe kinétochorienne médiées par le complexe NDC80. Références associées : PMID:27156448
• Au niveau subcellulaire, CKAP5 se localise dans le cytoplasme, le centrosome, les pôles du fuseau et les kinétochores lors de la division cellulaire.
• L'expression est élevée dans les tumeurs hépatiques et coliques, ainsi que dans les corps cellulaires de Purkinje du cervelet, avec une distribution tissulaire généralisée incluant le muscle squelettique, le cerveau, le cœur, le placenta, le poumon, le foie, le rein et le pancréas.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, et l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1763-2032 de CKAP5 humain ; par conséquent, l'anticorps peut reconnaître des épitopes dans cette région C-terminale. Envisagez d'utiliser des témoins positifs appropriés (par exemple, lysats cellulaires HeLa, HEK293) pour le Western Blot.
• En raison du poids moléculaire élevé (225 kDa), assurez-vous d'utiliser des gels SDS-PAGE à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés pour le transfert Western.
• Pour les applications d'immunofluorescence, attendez-vous à des motifs de coloration cohérents avec les réseaux de microtubules, les centrosomes et les fuseaux mitotiques. Le marquage conjoint avec des marqueurs centrosomaux (par exemple, γ-tubuline) peut aider à confirmer la localisation.
• Compte tenu de sa nature polyclonale, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée, et la titration de l'anticorps est recommandée pour un rapport signal/bruit optimal.

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