Anticorps monoclonal de lapin anti-citrate synthase pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O75390

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la citrate synthase

• La protéine cible est la citrate synthase, une enzyme mitochondriale appartenant à la famille des transférases, plus précisément aux acyltransférases qui convertissent les groupes acyles en groupes alkyles lors du transfert.
• Elle catalyse la condensation de l’acétyl-coenzyme A et de l’oxaloacétate pour former du citrate, première étape et étape limitante du cycle des acides tricarboxyliques (TCA), une voie centrale de la production d’énergie.
• Cette enzyme est localisée exclusivement dans la matrice mitochondriale, où se déroule le cycle TCA, fournissant des précurseurs pour la phosphorylation oxydative.
• En tant qu’enzyme clé du cycle TCA, l’activité de la citrate synthase est souvent utilisée comme marqueur de la teneur en mitochondries et de la capacité oxydative des tissus.
• L’enzyme subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation, la méthylation et la conjugaison à l’ubiquitine, qui peuvent moduler son activité.
• La protéine a été largement caractérisée par des études cristallographiques (structure 3D disponible) et par séquençage direct de la protéine, confirmant son poids moléculaire d’environ 52 kDa (environ 52 kDa calculés à partir de NP_004068.2).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 28 à 145 de la citrate synthase humaine, une région probablement exposée après la maturation mitochondriale, ce qui suggère la reconnaissance de la forme endogène mature.
• Pour le Western blot, une bande proche de 52 kDa est attendue ; le chargement de fractions enrichies en mitochondries ou l’utilisation de lysats cellulaires totaux provenant de tissus à forte activité métabolique peut améliorer la détection.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), veillez à assurer une récupération antigénique adéquate et envisagez de valider le signal dans des tissus à forte densité mitochondriale (par exemple, le cœur et le muscle squelettique).
• La réactivité croisée de l’anticorps avec la citrate synthase de souris et de rat permet de mener des études sur des modèles précliniques courants ; incluez toujours des témoins positifs et négatifs appropriés pour chaque application.
• Pour les applications ELISA, les conditions optimales de revêtement et la dilution de l’anticorps doivent être déterminées empiriquement en utilisant de la citrate synthase recombinante comme étalon.

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