Anticorps polyclonal anti-CISD2 pour WB, IHC-P, ELISA - Q8N5K1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CISD2

• La CISD2 (protéine 2 contenant un domaine fer-soufre CDGSH), également connue sous les noms d'ERIS, Miner1 et NAF-1, est une protéine de 135 acides aminés avec un poids moléculaire prédit d'environ 15 kDa.
• Elle contient un domaine CDGSH qui coordonne un cluster 2Fe-2S, caractéristique de la famille de protéines mitoNEET.
• La CISD2 est un régulateur clé de l'autophagie, fonctionnant au niveau du réticulum endoplasmique (RE) en médiant l'interaction entre BCL2 et BECN1, ce qui est nécessaire pour la dépression des réserves de Ca²⁺ du RE médiée par BCL2 lors de l'autophagie.
• Elle participe à l'autophagie initiée par BIK sans affecter l'activation des caspases dépendantes de BIK, ce qui indique un rôle spécifique dans les voies autophagiques plutôt qu'apoptotiques.
• La protéine se localise à la fois sur la membrane du RE et sur la membrane mitochondriale externe, reliant ces organites dans l'homéostasie cellulaire.
• La CISD2 est impliquée dans le contrôle de la durée de vie et son dysfonctionnement est associé au syndrome de Wolfram 2 (WFS2), un trouble caractérisé par un diabète sucré et une surdité.
• Elle est largement exprimée dans des tissus tels que les testicules, l'intestin grêle, les reins, les poumons, le cerveau, le cœur, le pancréas et les plaquettes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande à environ 15 kDa ; utilisez un lysat témoin positif provenant de lignées cellulaires ou de tissus humains, de souris ou de rats connus pour exprimer la CISD2 (par exemple, testicules, reins ou cerveau).
• En immunohistochimie (IHC-P), optimisez la récupération d'antigène (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur dans un tampon citrate pH 6) et validez en utilisant des coupes de tissus présentant une expression abondante, comme le pancréas ou l'intestin grêle.
• Pour l'ELISA, envisagez de coupler l'anticorps avec un anticorps de capture spécifique à la CISD2 si vous concevez un dosage en sandwich ; effectuez un titrage en damier pour déterminer les concentrations optimales.
• Étant donné que l'immunogène couvre les acides aminés 61–135, l'anticorps peut reconnaître la CISD2 endogène et recombinante ; la réactivité croisée avec les homologues de souris et de rat a été démontrée, mais une validation supplémentaire est recommandée pour d'autres espèces.
• Incluez des témoins positifs et négatifs appropriés (par exemple, lysats de CISD2 knockdown ou tissus) pour confirmer la spécificité dans votre système expérimental.

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