Anticorps polyclonal de lapin anti-CHTF18 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q8WVB6

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CHTF18

• CHTF18 (homologue de la protéine 18 de fidélité de transmission des chromosomes), également connu sous le nom de CHL12, est un facteur clé dans la cohésion des chromatides sœurs et assure une ségrégation précise des chromosomes pendant la division cellulaire.
• C'est un composant intégral du complexe CTF18-RFC (avec CTF8, DCC1, RFC2-5), un chargeur alternatif de PCNA qui se lie à l'ADN amorcé et simple brin et présente une activité ATPase dépendante de l'ADN stimulée par RPA et PCNA.
• Le complexe CTF18-RFC catalyse le chargement dépendant de l'ATP de la PCNA sur l'ADN amorcé et présentant des lacunes, jouant un rôle critique dans les processus de réplication et de réparation de l'ADN.
• CHTF18 interagit directement avec et stimule l'ADN polymérase POLH, et est impliqué dans le recrutement de l'ADN polymérase POLE sur les sites de dommages locaux de l'ADN pendant la synthèse de réparation. Références associées : PMID:20227374
• CHTF18 se localise principalement dans le noyau, ce qui est cohérent avec sa fonction dans la maintenance du génome.
• C'est une phosphoprotéine contenant des domaines de liaison à l'ATP et à l'ADN, et subit un épissage alternatif pour produire plusieurs isoformes, comme indiqué par des études d'identification protéomique et de structure 3D (Mots-clés UniProt : Structure 3D, Épissage alternatif, Liaison à l'ATP, Liaison à l'ADN, Liaison aux nucléotides, Noyau, Phosphoprotéine, Protéome de référence).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 794-975 dans la région C-terminale du CHTF18 humain ; vérifier la spécificité de l'anticorps dans des échantillons exprimant les isoformes pleine longueur et tronquées.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 107 kDa ; utiliser un pourcentage de gel de polyacrylamide approprié (par exemple, 8-10 %) et optimiser les conditions de transfert pour les protéines de haut poids moléculaire.
• En immunofluorescence/ICC, CHTF18 montre une coloration nucléaire ; choisir des protocoles de fixation et de perméabilisation qui préservent les antigènes nucléaires, et valider dans la lignée cellulaire pertinente (par exemple, HeLa ou autres cellules humaines/ de rat).
• Pour l'ELISA, confirmer la liaison au CHTF18 recombiné ou à l'antigène cible, et titrer la concentration d'anticorps pour établir une sensibilité et une spécificité optimales.

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