Anticorps polyclonal anti-CHRNA1 pour WB, IF, IHC, ELISA - P02708

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CHRNA1

• CHRNA1 code pour la sous-unité alpha du récepteur nicotinique à l'acétylcholine (AChR), un canal ionique à ligand qui médie la transmission synaptique rapide au niveau de la jonction neuromusculaire. Lors de la liaison de l'acétylcholine, le récepteur subit un changement conformationnel conduisant à l'ouverture du canal et à l'influx de cations.
• La protéine est également connue sous plusieurs alias : ACHRA, ACHRD, CHRNA, CMS1A, CMS1B, CMS2A, FCCMS, SCCMS. Deux isoformes existent en raison d'un épissage alternatif : l'isoforme 1 est spécifique du muscle squelettique, tandis que l'isoforme 2 est largement exprimée dans le cerveau, le cœur, le rein, le foie, le poumon et le thymus.
• CHRNA1 est un membre de la famille des canaux ioniques à ligand, caractérisé par un grand domaine extracellulaire N-terminal, quatre hélices transmembranaires et une boucle cytoplasmique. Il contient des ponts disulfure et des sites de glycosylation essentiels pour l'assemblage et la fonction du récepteur.
• Au niveau subcellulaire, l'AChR est localisé sur la membrane cellulaire postsynaptique, où il s'agrège au niveau de la jonction neuromusculaire. Une localisation correcte nécessite une interaction avec la rapsyn et d'autres protéines d'échafaudage.
• Les mutations dans CHRNA1 sont associées à des syndromes myasthéniques congénitaux (CMS), notamment CMS1A, CMS1B et CMS2A, ainsi qu'au syndrome myasthénique congénital à canaux lents (SCCMS). Ces mutations altèrent la cinétique du canal, l'expression du récepteur ou l'affinité pour l'agoniste.
• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps correspond aux acides aminés 105-220 de la protéine CHRNA1 humaine, qui se situe dans le domaine extracellulaire. Cette région est susceptible de reconnaître les deux isoformes et est conservée entre l'homme et la souris, permettant une réactivité croisée.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfure, importantes pour le repliement et la stabilité. La protéine a un poids moléculaire calculé d'environ 52 kDa, ce qui correspond à la bande observée en western blot.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps polyclonal est produit chez le lapin contre un fragment recombinant (aa 105-220). Pour le western blot, une bande autour de 52 kDa est attendue dans les lysats de muscle squelettique humain et murin ; envisagez d'utiliser des conditions réductrices et un tampon de blocage approprié pour minimiser la liaison non spécifique.
• Pour l'immunoprécipitation, la reconnaissance d'un épitope extracellulaire par l'anticorps peut être avantageuse ; cependant, une validation dans le système cellulaire/tissulaire pertinent est recommandée.
• En immunofluorescence et immunohistochimie, les méthodes optimales de fixation et de perméabilisation doivent être déterminées empiriquement, car l'épitope se trouve dans le domaine extracellulaire qui peut être sensible à une sur-fixation. Utilisez des contrôles appropriés comme des lignées cellulaires knock-out ou des peptides de blocage.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme anticorps de capture ou de détection ; effectuez un titrage pour déterminer la concentration de travail optimale.

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