Anticorps polyclonal anti-CHMP6 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q96FZ7

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CHMP6

• CHMP6 (charged multivesicular body protein 6), également appelé Vps20 ou protéine 6 de modification de la chromatine, est un composant central probable du complexe ESCRT-III (endosomal sorting required for transport complex III).
• Il est essentiel à la formation des corps multivésiculaires (MVB), médiant le tri des protéines cargo endosomales dans les vésicules intraluminales (ILV) destinées à la dégradation lysosomale.
• La machinerie ESCRT-III, incluant CHMP6, participe à des événements de fission membranaire topologiquement équivalents tels que les étapes terminales de la cytokinèse et le bourgeonnement de virus enveloppés (par exemple, le VIH-1).
• Au sein du complexe ESCRT-III, CHMP6 fonctionne probablement comme un accepteur pour le complexe ESCRT-II sur les membranes endosomales, facilitant le recrutement des sous-unités ESCRT-III en aval.
• La localisation subcellulaire inclut le système endomembranaire, la membrane endosomale et la membrane de l'endosome tardif, ce qui est cohérent avec son rôle dans le trafic endosomal.
• CHMP6 est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus humains, indiquant une fonction ménagère fondamentale dans la dynamique des membranes cellulaires.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la myristoylation et la phosphorylation, et la protéine contient des domaines enroulés (coiled-coil) critiques pour l'assemblage des filaments ESCRT-III.
• Le poids moléculaire prédit est d'environ 23,5 kDa (23 485 Da), ce qui est cohérent avec la bande de 23 kDa observée sur les gels dénaturants.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 111–200 du CHMP6 humain, une région centrale qui peut détecter la protéine entière et ses isoformes potentielles ; incluez des contrôles appropriés dans votre conception expérimentale.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des conditions réductrices et validez avec des lysats de lignées cellulaires humaines ou murines exprimant le CHMP6 endogène.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation, car les protéines associées aux membranes peuvent nécessiter des conditions spécifiques pour une localisation précise.
• Pour l'ELISA, testez des dilutions en série de CHMP6 recombinant ou d'extraits cellulaires pour déterminer les concentrations de travail optimales de l'anticorps et les limites de détection.
• La réactivité croisée avec l'humain et la souris a été confirmée ; si vous utilisez d'autres espèces, effectuez un alignement de séquence et, si nécessaire, validez la réactivité expérimentalement.

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