Anticorps polyclonal Anti-Chk2 de lapin pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - O96017

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Chk2

• Chk2 (Checkpoint kinase 2, codée par CHEK2) est une sérine/thréonine-protéine kinase qui agit comme un médiateur central de la réponse aux dommages à l'ADN, phosphorylant des effecteurs en aval pour imposer un arrêt du cycle cellulaire, une réparation de l'ADN ou l'apoptose en cas de cassures double brin.
• Elle phosphoryle préférentiellement les substrats au niveau de la séquence consensus [L-X-R-X-X-S/T] (PubMed:37943659). Références associées : PMID:37943659
• Chk2 régule les points de contrôle G1/S, S et G2/M en phosphorylant et en inhibant les phosphatases CDC25 (CDC25A, B, C), maintenant ainsi la phosphorylation inhibitrice sur tyrosine des complexes CDK-cycline.
• Elle favorise la réparation de l'ADN par recombination homologue en phosphorylant BRCA2, ce qui améliore le chargement de RAD51 sur la chromatine, et stimule la transcription des gènes de réparation via l'activation de FOXM1.
• En tant que suppresseur de tumeur, Chk2 déclenche également l'apoptose en phosphorylant p53/TP53 au niveau de Ser-20, réduisant la dégradation médiée par MDM2, et en activant le facteur de transcription E2F1.
• Chk2 médie l'inhibition de SIRT1 dépendante de CCAR2, un processus crucial pour l'acétylation de p53 et l'apoptose (PubMed:25361978). Références associées : PMID:25361978
• Lors d'un stress oxydatif, Chk2 phosphoryle TRIM32 au niveau de Ser-55, favorisant l'ubiquitination d'ATG7 et régulant positivement l'autophagie (PubMed:37943659). Références associées : PMID:37943659
• Chk2 est principalement localisée dans le noyau, y compris dans les corps PML et le nucléoplasme, et est fortement exprimée dans les testicules, la rate, le côlon et les leucocytes sanguins périphériques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre la région N-terminale (résidus 1-220) de la Chk2 humaine, qui inclut le domaine kinase ; tenez compte de l'accessibilité de l'épitope dans différentes conditions de fixation et de dénaturation.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 61 kDa, mais des bandes supplémentaires peuvent apparaître en raison d'épissages alternatifs ou de modifications post-traductionnelles ; validez la spécificité en utilisant des contrôles appropriés.
• Cet anticorps polyclonal est applicable pour l'immunoprécipitation et l'ELISA ; pour l'IF/ICC, l'optimisation des étapes de perméabilisation et de blocage est recommandée pour minimiser le bruit de fond.
• Étant donné que l'activation de Chk2 est stimulée par les dommages à l'ADN, le traitement des cellules avec des agents génotoxiques (par exemple, l'étoposide, les rayonnements ionisants) peut améliorer la détection des formes phosphorylées.

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