Anticorps polyclonal de lapin anti-Chk1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O14757

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Chk1

• Chk1 (Checkpoint kinase-1) est une sérine/thréonine protéine kinase codée par le gène CHEK1, fonctionnant comme une kinase clé de point de contrôle du cycle cellulaire.
• Nécessaire pour l'arrêt du cycle cellulaire médié par les points de contrôle et l'activation de la réparation de l'ADN en réponse à la présence de dommages à l'ADN ou d'ADN non répliqué. Références connexes : PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• Reconnaît la séquence consensus du substrat [R-X-X-S/T] et phosphorylate CDC25A, CDC25B et CDC25C, conduisant à leur inhibition par liaison à 14-3-3 ou dégradation protéasomique, bloquant ainsi la progression du cycle cellulaire. Références connexes : PMID:9278511, PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:19734889, PMID:20090422
• Phosphoryle RAD51 au résidu Thr-309, améliorant son association à la chromatine pour promouvoir la réparation de l'ADN par recombinaison homologue. Références connexes : PMID:15665856
• Phosphoryle TP53 sur plusieurs sites C-terminaux, favorisant l'activation de TP53 par acétylation, conduisant à l'arrêt du cycle cellulaire et à la suppression de la prolifération. Références connexes : PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• Modifie l'assemblage de la chromatine en phosphorylant TLK1, empêchant la phosphorylation d'ASF1A, et participe à la réparation des ponts interbrins de l'ADN via la phosphorylation de FANCE. Références connexes : PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:17296736
• Se localise dans le noyau, les chromosomes, le cytoplasme et le centrosome.
• Exprimé de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus, les testicules, l'intestin grêle et le côlon.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre une région centrale conservée (aa 148–307) de Chk1, soutenant la réactivité croisée avec l'humain, la souris et le rat. Une validation dans les espèces pertinentes est recommandée.
• Pour le Western blotting, une bande autour de 54 kDa est attendue. Les lysats de thymus ou de testicules, qui expriment des niveaux élevés de Chk1, peuvent servir de témoins positifs.
• Lors de la réalisation d'IHC-P ou d'IF/ICC, envisagez l'optimisation de la fixation et de la perméabilisation pour améliorer la détection du Chk1 nucléaire et centrosomal.
• ELISA peut être utilisé pour quantifier Chk1 dans des lysats cellulaires ou des préparations de protéines recombinantes ; un étalonnage par rapport à une courbe standard dans la matrice spécifique est conseillé.

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