Anticorps polyclonal de lapin anti-CHIT1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q13231

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CHIT1

• CHIT1 code la chitotriosidase-1, une glycoprotéine sécrétée appartenant à la famille 18 des glycosyl-hydrolases, impliquée dans la dégradation de la chitine.
• La protéine hydrolyse la chitine, la chitotriose et la chitobiose, jouant un rôle dans la défense contre les agents pathogènes contenant de la chitine, tels que les nématodes.
• L’épissage alternatif produit l’isoforme 3, dépourvue d’activité enzymatique.
• La localisation subcellulaire comprend la sécrétion dans l’espace extracellulaire ainsi que la présence dans le compartiment lysosomal.
• L’expression tissulaire est particulièrement importante dans la rate et les macrophages, ce qui concorde avec une fonction de défense immunitaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation et la formation de ponts disulfure, essentielles à la stabilité et à l’activité.
• La protéine contient un domaine de liaison à la chitine ; elle est classée parmi les hydrolases, les protéines du métabolisme des glucides et les protéines impliquées dans la dégradation des polysaccharides.
• Des données directes de séquençage protéique étayent son identification.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 217 à 466 de la CHIT1 humaine, ciblant le domaine catalytique tout en excluant le peptide signal. Cette région peut détecter les isoformes actives ainsi que l’isoforme 3 catalytiquement inactive si l’épitope est conservé.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d’utiliser des lysats de lignées cellulaires de macrophages humains ou du tissu splénique comme témoins positifs. La taille de bande attendue est d’environ 52 kDa ; notez que la glycosylation peut entraîner de légers décalages de migration.
• En immunohistochimie (IHC-P), testez les performances de l’anticorps sur des coupes de rate humaine fixées au formol et incluses en paraffine, en utilisant des méthodes appropriées de récupération antigénique.
• Les applications ELISA peuvent être utilisées pour quantifier la CHIT1 recombinante ou la protéine endogène dans des fluides biologiques ; validez les résultats à l’aide d’une courbe standard établie avec une protéine purifiée.
• La réactivité croisée avec la souris suggère une utilité dans les modèles murins ; toutefois, un alignement des séquences est recommandé afin de confirmer la conservation de l’épitope.

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