Anticorps monoclonal lapin anti-ChAT pour WB, ELISA - P28329

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la ChAT

• La choline O-acétyltransférase (ChAT) est également connue sous les alias CHOACTASE, CMS6, CMS1A et CMS1A2.
• Elle catalyse la synthèse réversible de l'acétylcholine (ACh) à partir d'acétyl-CoA et de choline au niveau des synapses cholinergiques, une étape clé de la neurotransmission cholinergique.
• La ChAT est fortement exprimée dans les neurones cholinergiques du système nerveux central et périphérique, et est localisée au niveau des terminaisons présynaptiques.
• L'épissage alternatif du gène CHAT génère plusieurs variants de transcrits, susceptibles d'influencer l'activité enzymatique ou sa régulation.
• Des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, ont été identifiées, bien que leur impact fonctionnel reste à l'étude.
• Des mutations du gène CHAT sont associées au syndrome myasthénique congénital (SMC), un groupe de pathologies caractérisées par une altération de la transmission neuromusculaire.
• La protéine a un poids moléculaire prédit d'environ 83 kDa, ce qui est cohérent avec l'observation validée du produit par Western blot.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• La séquence de l'immunogène (acides aminés 649‑748) se trouve dans une région très conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la large réactivité croisée. Prenez cela en compte lors de l'analyse des résultats entre différentes espèces.
• Pour le Western blot, réalisez l'électrophorèse des échantillons dans des conditions réductrices et attendez une bande spécifique proche de 83 kDa. Utilisez une membrane PVDF à faible fluorescence pour une détection optimale.
• Dans les protocoles ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; réalisez un titrage précis contre la protéine ChAT recombinante ou les lysats tissulaires natifs.
• Effectuez le blocage avec 5 % de lait écrémé ou de BSA dans du TBST et incubez l'anticorps primaire toute nuit à 4 °C pour obtenir le meilleur ratio signal/bruit.
• Toujours valider l'anticorps dans votre matrice d'échantillon spécifique (par exemple : homogénat cérébral, préparations de terminaisons nerveuses) avant de réaliser des essais quantitatifs.

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