Anticorps polyclonal anti-CHAT pour WB, IHC, IF, ELISA - P28329

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la choline O-acétyltransférase

• La choline O-acétyltransférase (CHAT, également appelée CHOACTASE) est l'enzyme responsable de la synthèse du neurotransmetteur acétylcholine à partir d'acétyl-CoA et de choline.
• CHAT catalyse la réaction réversible au niveau des synapses cholinergiques, jouant un rôle essentiel dans la neurotransmission au sein des systèmes nerveux central et périphérique.
• En tant qu'enzyme clé de la biosynthèse de l'acétylcholine, CHAT est indispensable à la fonction des neurones cholinergiques et est impliqué dans la signalisation neuromusculaire.
• Les mutations du gène CHAT sont associées au syndrome myasthénique congénital (SMC), un groupe de troubles neuromusculaires caractérisés par un défaut de transmission du signal au niveau de la jonction neuromusculaire.
• CHAT subit un épissage alternatif, générant plusieurs isoformes qui peuvent présenter des profils d'expression tissu-spécifiques.
• La protéine est phosphorylée, ce qui indique des rôles régulateurs potentiels sur l'activité enzymatique via des modifications post-traductionnelles.
• Classée comme acyltransférase et transférase, CHAT appartient à une famille d'enzymes qui transfèrent des groupes fonctionnels vers des substrats.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 331-630 de CHAT humain, une région probablement conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui confirme la réactivité croisée revendiquée.
• Pour le Western blot (WB), utilisez des conditions dénaturantes/réductrices et attendez une bande majoritaire proche de 83 kDa, ce qui correspond à la protéine CHAT entière ; validez avec des lysats de contrôle positifs issus de tissus cérébraux humains, de souris ou de rat.
• Pour les applications d'immunofluorescence (IF/ICC ou IF-P) et d'immunohistochimie (IHC-P), testez les performances de l'anticorps sur des cellules ou des coupes de tissu fixées et perméabilisées ; l'inclusion de contrôles négatifs (par exemple, échantillons knock-out ou déplétés pour CHAT) est recommandée.
• Lorsqu'il est utilisé en ELISA, la nature polyclonale peut fournir un signal amélioré ; cependant, la cohérence entre lots doit être vérifiée pour les dosages quantitatifs.
• Pour maximiser la spécificité, il est conseillé aux chercheurs de titrer l'anticorps pour leurs systèmes expérimentaux spécifiques et de confirmer les résultats avec des réactifs de détection secondaires optimisés pour les IgG de lapin.

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