Anticorps polyclonal de lapin anti-CHAMP1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q96JM3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CHAMP1

• CHAMP1 (Chromosome alignment-maintaining phosphoprotein 1), également appelée Zinc finger protein 828, est une protéine nucléaire d’un poids moléculaire apparent d’environ 89 kDa qui joue un rôle essentiel dans la ségrégation des chromosomes mitotiques.
• Elle est nécessaire pour l’alignement correct des chromosomes sur la plaque métaphasique et assure une ségrégation précise en maintenant l’attachement des microtubules du fuseau aux kinétochores pendant la biorientation des chromatides sœurs.
• CHAMP1 peut recruter les protéines associées aux kinétochores CENPE (protéine centromérique E) et CENPF au niveau du kinétochore, facilitant les interactions entre microtubules et kinétochores.
• La protéine se localise dans le noyau et se concentre au niveau de la région centromère/kinétochore des chromosomes pendant la mitose ; on la trouve également associée au fuseau mitotique et au cytosquelette cytoplasmique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, l’acétylation et l’ubiquitinylation, qui régulent probablement ses fonctions mitotiques.
• CHAMP1 contient un domaine à doigt de zinc, ce qui suggère des capacités de liaison à l’ADN ou à des protéines qui pourraient contribuer à son rôle de ciblage de la chromatine ou des kinétochores.
• Les mutations de CHAMP1 sont associées à un retard intellectuel (MRD40/NEDHILD), ce qui souligne son importance dans le développement neurologique et la division cellulaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• Comme l’immunogène couvre les régions 563–812, l’anticorps reconnaît probablement à la fois CHAMP1 pleine longueur et tous les isoformes contenant cette portion C-terminale ; validez la spécificité dans des systèmes de knockout ou de knockdown.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 89 kDa ; prévoyez l’utilisation d’un gel à pourcentage élevé (par exemple 8–10 %) avec un temps de transfert suffisant pour les protéines de haut poids moléculaire.
• Pour l’immunofluorescence/ICC, les méthodes de fixation et de perméabilisation peuvent influencer la coloration des kinétochores/chromosomes ; testez une fixation au méthanol ou au formaldéhyde avec une perméabilisation au Triton X-100.
• L’anticorps réagit de manière croisée avec le CHAMP1 de souris, ce qui le rend adapté aux études sur des lignées cellulaires ou des tissus murins ; cependant, l’alignement de séquence dans la région de l’immunogène doit être vérifié.
• Réalisez des expériences de titration par ELISA pour déterminer la concentration optimale d’antigène de revêtement et la dilution de l’anticorps pour les configurations d’ELISA sandwich ou direct.

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