Anticorps polyclonal anti-CGRP pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P01258 / P06881

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CGRP (Peptide lié au gène de la calcitonine)

• Le gène CALCA subit un épissage alternatif pour produire deux hormones peptidiques : la calcitonine et le peptide lié au gène de la calcitonine (CGRP, également connu sous le nom de CGRP1, CGRP-alpha, CGRP-I). Cet anticorps reconnaît spécifiquement l'isoforme CGRP.
• La calcitonine, codée par le même gène, est une hormone peptidique de 32 acides aminés qui réduit rapidement les taux sanguins de calcium et de phosphate en favorisant leur dépôt dans les os. Cependant, l'anticorps a été produit contre la séquence spécifique du CGRP.
• La signalisation de la calcitonine est médiée par le récepteur de la calcitonine (CALCR) et le complexe récepteur CALCR-RAMP2 (AMYR2) (PubMed:35324283). Références associées : PMID:35324283
• La katacalcine, un autre produit de clivage du précurseur, présente également une activité hypocalcémiante.
• Selon UniProt, la protéine est sécrétée et subit des modifications post-traductionnelles clés, notamment l'amidation, la formation de ponts disulfure et la phosphorylation.
• L'immunogène couvre les résidus 49–128 du prépropeptide, englobant la région mature du CGRP ; l'anticorps devrait détecter à la fois les formes précurseur et mature du CGRP dans les échantillons pertinents.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant la région pro-CGRP (aa 49–128). Pour le Western blot, des bandes à ~13 kDa et/ou ~15 kDa peuvent être observées, correspondant aux formes précurseurs ; le CGRP mature (~3,8 kDa) peut migrer au front du colorant.
• Envisagez d'utiliser des gels tricine à faible pourcentage ou des systèmes d'électrophorèse spécialisés pour séparer les petits peptides si la détection du CGRP mature est souhaitée.
• Le blocage avec du BSA plutôt qu'avec du lait peut réduire le bruit de fond, car le CGRP est un petit peptide fortement modifié.
• Pour l'immunohistochimie et l'immunofluorescence, effectuez une récupération antigénique adaptée au tissu et validez la coloration dans des tissus connus pour être positifs au CGRP (par exemple, neurones sensoriels, tissu cardiovasculaire).
• Une réactivité croisée est rapportée avec la souris et le rat ; cependant, les niveaux d'expression endogène varient selon les tissus et les états pathologiques, une optimisation de la préparation des échantillons est donc conseillée.

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