Anticorps monoclonal de lapin anti-cGAS pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N884

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du cGAS

• Le cGAS (synthase de GMP-AMP cyclique), également connu sous le nom de MB21D1 ou C6orf150, est codé par le gène CGAS. L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• Il agit comme une nucléotidyltransférase qui catalyse la synthèse du dinucléotide cyclique 2'3'-cGAMP à partir d'ATP et de GTP. Références associées : PMID:21478870, PMID:23258413, PMID:23707061, PMID:28214358, PMID:28363908
• Le cGAS est un capteur cytoplasmique clé de l'ADN qui se lie directement à l'ADN double brin (ADNdb) d'une longueur et d'une courbure suffisantes, conduisant à une condensation en phase liquide et à une activation enzymatique. Références associées : PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794, PMID:30007416
• Après activation, le 2'3'-cGAMP produit par le cGAS se lie à l'adaptateur STING1, déclenchant une cascade de signalisation qui induit les interférons de type I et d'autres médiateurs immunitaires. Références associées : PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794
• Le cGAS détecte l'ADNdb provenant d'un large éventail d'agents pathogènes, y compris les virus à ADN, les rétrovirus (par exemple, le VIH-2) et les bactéries (par exemple, M. tuberculosis), ce qui en fait une sentinelle immunitaire innée à large spectre. Références associées : PMID:28363908, PMID:35613581, PMID:23929945, PMID:24269171, PMID:30270045, PMID:26048138
• En situation de stress cellulaire (dommages mitochondriaux, sénescence, dommages à l'ADN), l'ADN du soi fuit dans le cytoplasme ou s'accumule sous forme de micronoyaux, activant de manière aberrante le cGAS et conduisant à une inflammation stérile. Références associées : PMID:28738408, PMID:28759889, PMID:31299200
• Le cGAS réside principalement dans le cytoplasme mais se trouve également dans le noyau, où sa liaison aux nucléosomes sur la chromatine inhibe son activité pour prévenir une activation auto-immune. Références associées : PMID:31299200, PMID:32911482, PMID:32912999
• Au-delà de l'immunité, le cGAS module la réparation des dommages à l'ADN en interagissant avec PARP1 pour supprimer la recombination homologue et détecte le stress traductionnel en s'associant aux ribosomes en collision. Références associées : PMID:30356214, PMID:31544964, PMID:34111399
• Son expression tissulaire est rapportée dans la lignée cellulaire monocytaire THP1 ; les modifications post-traductionnelles (acétylation, phosphorylation, ubiquitination, palmitoylation) régulent dynamiquement la localisation et l'activité du cGAS.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un peptide situé dans la région C-terminale (aa 430–522) du cGAS humain. Envisagez de vérifier la reconnaissance de tous les variants d'épissage si plusieurs isoformes sont pertinentes.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 59 kDa est attendue ; utilisez des contrôles positifs appropriés (par exemple, un lysat de cellules THP1). Validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des échantillons avec knockout ou knockdown du cGAS.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), des conditions optimisées de démasquage antigénique et de perméabilisation peuvent être nécessaires. Incluez des contrôles appropriés pour confirmer la localisation nucléaire/cytoplasmique.
• Dans les applications ELISA, assurez-vous que le tampon de coating et les conditions de détection sont compatibles avec le format monoclonal de lapin.
• La réactivité croisée n'a été testée que sur des échantillons humains ; la réactivité avec d'autres espèces n'est pas caractérisée et doit être déterminée expérimentalement.

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