Anticorps polyclonal anti-cGAS pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N884

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du cGAS

• La synthase de GMP-AMP cyclique (cGAS, également connue sous le nom de MB21D1) est une nucléotidyltransférase de 522 acides aminés qui catalyse la synthèse du 2'3'-cGAMP à partir d'ATP et de GTP, jouant un rôle central dans l'immunité innée.
  Références associées : PMID:21478870, PMID:23258413, PMID:23707061
• Après liaison à de l'ADN double brin (ADNdb) de plus de 40 pb, le cGAS subit une séparation de phases liquide-liquide, formant des gouttelettes qui améliorent son activité catalytique pour produire du 2'3'-cGAMP, qui agit ensuite comme un second messager pour activer STING1 et induire des interférons de type I.
  Références associées : PMID:28314590, PMID:28363908, PMID:29976794, PMID:30007416
• En tant que capteur d'ADN, le cGAS détecte l'ADN cytosolique provenant d'agents pathogènes envahissants — y compris les virus à ADN, les rétrovirus (par exemple, le VIH-2) et les bactéries comme Mycobacterium tuberculosis — déclenchant des réponses immunitaires antimicrobiennes.
  Références associées : PMID:28363908, PMID:35613581, PMID:23929945, PMID:26048138, PMID:24269171, PMID:30270045, PMID:26046437
• Dans les cellules stressées ou endommagées, l'ADN endogène fuyant du noyau ou des mitochondries (par exemple, pendant la sénescence, l'arrêt mitotique ou l'infection par le SRAS-CoV-2) active le cGAS, le reliant à l'inflammation stérile, à l'auto-immunité et à la sénescence cellulaire.
  Références associées : PMID:28738408, PMID:28759889, PMID:31299200
• Le cGAS nucléaire est étroitement régulé : l'interaction avec les nucléosomes bloque son activité de liaison à l'ADN pour prévenir l'auto-immunité, tandis que l'association avec PARP1 inhibe la réparation de l'ADN par recombination homologue.
  Références associées : PMID:31299200, PMID:32911482, PMID:32912999, PMID:30356214, PMID:31544964
• Le cGAS humain présente des propriétés de reconnaissance de l'ADN spécifiques à l'espèce, produisant des niveaux plus faibles de 2'3'-cGAMP par rapport à d'autres mammifères, ce qui pourrait conférer une réponse immunitaire plus finement réglée.
  Référence associée : PMID:30007416
• Le cGAS est principalement cytosolaire mais se localise également dans le noyau, la chromatine et la membrane plasmique. Il est exprimé dans les cellules monocytaires (par exemple, la lignée THP-1) et est sujet à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment acétylation, phosphorylation, ubiquitination et palmitoylation.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 350–522 du cGAS humain (NP_612450.2), couvrant le domaine catalytique C-terminal. Pour le transfert Western, attendez-vous à une bande à environ 59 kDa. Validez la spécificité dans des lignées cellulaires exprimant le cGAS telles que THP-1.
• Cet anticorps est adapté pour détecter le cGAS dans des échantillons humains, murins et de rat via WB, IHC-P, IF/ICC et ELISA. En raison de la conservation de la séquence, la réactivité croisée doit être vérifiée dans l'espèce d'intérêt.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), l'optimisation de la récupération antigénique et de la dilution de l'anticorps primaire est recommandée. Pour l'IF/ICC, les conditions de perméabilisation peuvent affecter les profils de coloration nucléaire versus cytosolique.
• L'activité catalytique du cGAS dépend de la liaison à l'ADN et de la séparation de phases ; ainsi, l'anticorps peut être utilisé pour étudier les états d'activation du cGAS en conjonction avec des tests biochimiques.

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