Anticorps polyclonal de lapin anti-CEBPA pour WB, IHC-P, ELISA - P49715

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CEBPA

• CEBPA (CCAAT/enhancer-binding protein alpha, également appelé C/EBP-alpha) est un facteur de transcription codé par le gène CEBPA. Il agit comme régulateur maître de l'arrêt de la prolifération et de la différenciation terminale dans de nombreux types cellulaires, notamment les progéniteurs myéloïdes, les adipocytes et les hépatocytes.
• Il se lie directement à la séquence consensus d'ADN 5'-T[TG]NNGNAA[TG]-3' et fonctionne comme activateur transcriptionnel sur des gènes cibles distincts. Références associées : PMID:11242107
• Au cours de l'embryogenèse précoce, CEBPA joue des rôles essentiels et redondants avec CEBPB, et est essentiel au bon développement du foie et du poumon (par similarité).
• Dans le système hématopoïétique, CEBPA est indispensable à la transition des progéniteurs myéloïdes communs (CMP) vers les progéniteurs granulocytes/monocytes (GMP), une étape clé de l'engagement de la lignée myéloïde (par similarité).
• Pour induire la différenciation terminale des adipocytes et des granulocytes, CEBPA régule à la baisse les gènes qui maintiennent un état indifférencié et prolifératif via la répression d'E2F1, un processus qui nécessite une interaction fonctionnelle avec le complexe de remodelage de la chromatine SWI/SNF. Références associées : PMID:14660596
• L'initiation alternative de la traduction génère différents isoformes protéiques ; l'isoforme 2 agit comme régulateur dominant-négatif avec une activité de transactivation plus faible et une incapacité à inhiber la prolifération cellulaire. Références associées : PMID:14660596
• CEBPA augmente directement et spécifiquement la transcription de l'ADN ribosomique en interagissant avec les cofacteurs spécifiques de l'ARN polymérase I et en induisant l'acétylation des histones, une fonction associée à sa localisation nucléolaire.
• Il se localise principalement dans le noyau et le nucléole, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la régulation transcriptionnelle des gènes codant pour des protéines et des gènes ribosomiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 111–180 de CEBPA humaine) se trouve dans le domaine de transactivation et est très conservé chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée. Il est recommandé de valider la réactivité dans votre système d'échantillon.
• Pour le Western blot (WB), une bande majeure proche de 38 kDa est attendue pour l'isoforme pleine longueur. En raison de l'initiation alternative et des modifications post-traductionnelles, des bandes supplémentaires peuvent apparaître. Il est recommandé d'utiliser des extraits nucléaires de lignées cellulaires avec des voies CEBPA actives (par exemple, lignées d'hépatome ou lignées myéloïdes).
• En immunhistochimie (IHC-P), une coloration nucléaire est attendue dans des tissus tels que le foie, le tissu adipeux et la moelle osseuse. Le récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps doivent être optimisés pour chaque type de tissu.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection. Il est recommandé de l'associer à un anticorps de détection ou un conjugué secondaire approprié pour obtenir des essais sensibles.

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