Anticorps monoclonal de lapin anti-CDKN2A/p16INK4a pour WB, IF/ICC, ELISA - P42771

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDKN2A/p16INK4a

• CDKN2A code pour l'inhibiteur de kinase dépendante des cyclines 2A, également connu sous le nom de p16INK4a. Il s'agit d'un suppresseur de tumeur clé qui régule négativement la progression du cycle cellulaire en inhibant CDK4 et CDK6, empêchant ainsi la phosphorylation de la protéine du rétinoblastome et bloquant la transition G1/S.
• p16INK4a est un membre de la famille des inhibiteurs de CDK INK4 et contient quatre motifs de répétition ankyrine essentiels à son interaction avec les CDK.
• La localisation subcellulaire inclut à la fois le cytoplasme et le noyau, reflétant son rôle dynamique dans la régulation du cycle cellulaire.
• Largement exprimé dans la plupart des tissus, mais notablement absent dans le cerveau et les muscles squelettiques ; une isoforme spécifique au pancréas (isoforme 3) a été identifiée.
• Les modifications post-traductionnelles telles que l'acétylation et la phosphorylation modulent la stabilité et la fonction de p16INK4a.
• Les altérations génétiques de CDKN2A sont liées à divers cancers, notamment le mélanome et le syndrome de Li-Fraumeni, soulignant son importance en tant que suppresseur de tumeur.
• La protéine a un poids moléculaire prédit d'environ 16,5 kDa (UniProt) et est détectée autour de 17 kDa dans les conditions expérimentales.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été produit contre un peptide synthétique couvrant les acides aminés 57-156 de la protéine humaine CDKN2A/p16INK4a, incluant une région contenant des domaines de répétition ankyrine clés ; par conséquent, il est susceptible de reconnaître la protéine native dans de multiples applications.
• Pour le Western blot, une bande à environ 17 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des lysats de lignées cellulaires présentant une expression variable de p16INK4a ou des contrôles knockout pour confirmer la spécificité (le produit est validé KO).
• En immunofluorescence/ICC, attendez-vous à un marquage à la fois dans les compartiments nucléaires et cytoplasmiques ; les protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés doivent être validés pour votre système d'échantillon spécifique.
• La performance en ELISA doit être évaluée en utilisant de la p16INK4a recombinante ou des antigènes peptidiques ; l'anticorps peut être adapté au développement d'immunoessais en sandwich lorsqu'il est associé à des réactifs de capture et de détection appropriés.
• La réactivité croisée a été démontrée pour la p16INK4a humaine ; la réactivité avec d'autres espèces ou isoformes doit être vérifiée expérimentalement si nécessaire.

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