Anticorps polyclonal de lapin anti-CDKN1A/p21CIP1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P38936

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDKN1A/p21CIP1

• CDKN1A/p21CIP1 est un inhibiteur de kinases dépendantes des cyclines qui joue un rôle essentiel dans le contrôle de la progression du cycle cellulaire et de l'arrêt G2 induit par les dommages de l'ADN (PubMed:9106657). Références associées : PMID:9106657
• La protéine agit comme médiateur clé de l'inhibition de la prolifération cellulaire dépendante de p53/TP53 en réponse aux dommages de l'ADN, et participe également à des voies d'arrêt G2 indépendantes de p53 dans certains types cellulaires.
• p21 se lie aux kinases dépendantes des cyclines et inhibe leur activité, empêchant la phosphorylation de substrats essentiels comme RB1 pour bloquer la progression du cycle cellulaire ; il facilite également la localisation nucléaire et l'assemblage du complexe cycline D-CDK4, son effet sur l'activité kinase dépendant de la stœchiométrie.
• Il inhibe la synthèse d'ADN en se liant à PCNA (antigène nucléaire des cellules en prolifération) et en entrant en compétition avec POLD3 pour la liaison à PCNA, bloquant ainsi la processivité de l'ADN polymérase delta (PubMed:11595739). Références associées : PMID:11595739
• CDKN1A se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui lui permet de réguler la machinerie du cycle cellulaire et d'autres processus dans de multiples compartiments sous-cellulaires.
• Il est exprimé de manière ubiquiste dans tous les tissus adultes, avec des niveaux notablement plus faibles dans le cerveau.
• La protéine possède un domaine à doigt de zinc et est soumise à des modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation et l'acétylation, qui modulent sa stabilité et ses interactions.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 164 de p21 humain ; cette région inclut le domaine N-terminal impliqué dans la liaison aux CDK et aux cyclines, ce qui permet d'obtenir des anticorps capables de reconnaître la protéine native et dénaturée.
• Pour l'analyse par Western blot (WB), on s'attend à une bande d'environ 18 kDa correspondant à p21 ; cependant, en raison des modifications post-traductionnelles, des décalages légers peuvent être observés.
• Lors de la réalisation d'immunohistochimie (IHC-P) ou d'immunofluorescence (IF/ICC), l'optimisation de la préparation des échantillons et du démasquage antigénique peut être nécessaire pour obtenir une coloration robuste.
• La réactivité croisée de l'anticorps avec p21 de souris et de rat a été observée, mais il est recommandé de vérifier la spécificité dans le tissu ou la lignée cellulaire cible étudiée.
• Pour les applications ELISA, des titrations préliminaires en échiquier sont recommandées pour déterminer les concentrations optimales d'anticorps de revêtement et de détection.

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