Anticorps monoclonal de lapin anti-CDKN1A/p21CIP1 pour WB, IP, IF/ICC, ELISA - P38936

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CDKN1A/p21CIP1

• L'inhibiteur 1 des kinases dépendantes des cyclines (p21) est un inhibiteur puissant des kinases dépendantes des cyclines, essentiel au contrôle de la progression du cycle cellulaire aux points de contrôle G1/S et G2/M. Références associées : PMID:9106657
• Il assure l'inhibition de la prolifération cellulaire dépendante de p53/TP53 en réponse aux dommages à l'ADN et participe également à l'arrêt en phase G2 indépendant de p53 via CREB3L1 dans certains types cellulaires spécifiques, tels que les astrocytes et les ostéoblastes.
• p21 se lie aux complexes cycline D-CDK4, cycline E-CDK2 et cycline A-CDK2 et les inhibe ; cependant, à faible stœchiométrie, il peut également faciliter l'assemblage et l'importation nucléaire des complexes cycline D-CDK4, favorisant ainsi la phosphorylation de RB1.
• Il inhibe directement la synthèse de l'ADN en entrant en compétition avec POLD3 pour sa liaison à l'antigène nucléaire des cellules en prolifération (PCNA), bloquant ainsi l'activité de l'ADN polymérase delta. Références associées : PMID:11595739
• La localisation subcellulaire comprend à la fois le noyau et le cytoplasme, ce qui reflète ses rôles dans la régulation nucléaire du cycle cellulaire et ses fonctions cytoplasmiques.
• p21 est largement exprimé dans tous les tissus adultes, avec des niveaux environ cinq fois plus faibles dans le cerveau.
• La protéine est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui régulent sa stabilité, sa localisation et sa fonction.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour l'analyse par Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 18 kDa ; il est conseillé d'utiliser un marqueur de faible poids moléculaire et d'optimiser les conditions de transfert.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), validez l'efficacité de l'anticorps avec des lysats témoins positifs appropriés, tels que des cellules traitées pour induire des dommages à l'ADN et exprimant p21.
• Pour l'immunofluorescence/immunocyt chimie (IF/ICC), p21 présente une localisation à la fois nucléaire et cytoplasmique ; veillez à ce que les conditions de perméabilisation et de fixation conviennent aux deux compartiments.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme agent de capture ou de détection ; validez la linéarité et la spécificité à l'aide de la protéine p21 recombinante ou de lysats cellulaires.
• Compte tenu de sa réactivité croisée avec la souris, cet anticorps convient aux études sur des tissus murins ; vérifiez toutefois ses performances dans vos essais spécifiques.

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