Anticorps polyclonal de lapin anti-CDK9 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50750

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDK9

• CDK9 est une sérine/thréonine protéine kinase qui agit comme sous-unité catalytique du complexe facteur d'élongation de la transcription positive b (P-TEFb), qui joue un rôle central dans la régulation de la transcription. Références associées : PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967
• Le complexe P-TEFb phosphoryle le domaine C-terminal (CTD) de l'ARN polymérase II ainsi que les facteurs d'élongation DSIF et NELF, ce qui favorise une élongation productive de la transcription. Références associées : PMID:10574912, PMID:10757782, PMID:11145967, PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:9857195
• CDK9 phosphoryle les facteurs de transcription et les co-activateurs, notamment MYOD1, EP300 et le récepteur aux androgènes (RA), modulant ainsi leur activité transcriptionnelle et leur sélectivité pour les promoteurs. Références associées : PMID:10912001, PMID:11112772, PMID:12037670
• Il régule les réseaux de transcription induits par les cytokines en facilitant la reconnaissance des promoteurs par des facteurs de transcription tels que RELA/p65 induit par TNF et STAT3 induit par l'IL-6. Références associées : PMID:17956865, PMID:18362169
• Le complexe P-TEFb est impliqué dans les modifications co-transcriptionnelles des histones (par exemple H2Bub1, H3K4me3, H3K36me3) et le traitement de l'ARN, reliant l'élongation de la transcription à la dynamique de la chromatine et à la maturation de l'ARNm. Références associées : PMID:15564463, PMID:19575011, PMID:19844166
• CDK9 phosphoryle également directement l'histone H1.4 au niveau du résidu Ser-187 et KAT5, contribuant à l'ouverture de la chromatine et au recrutement des histones acétransférases. Références associées : PMID:28539972, PMID:29335245
• En complexe avec la cycline K, CDK9 favorise l'intégrité du génome en facilitant la récupération après un stress de réplication, limitant l'accumulation d'ADN simple brin et prévenant l'effondrement des fourches de réplication. L'isoforme 2 peut également intervenir dans la réparation de l'ADN par interaction avec KU70/XRCC6. Références associées : PMID:20493174
• CDK9 est une protéine exprimée de manière ubiquitaire, présente dans le noyau et le cytoplasme, où elle se localise dans les corps PML ; elle est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 153 à 372 de la protéine CDK9 humaine, couvrant le domaine kinase ; cette région étant conservée, l'anticorps peut reconnaître plusieurs isoformes de CDK9. Validez la spécificité vis-à-vis de l'isoforme d'intérêt dans votre système expérimental si nécessaire.
• Pour le western blot, une bande principale proche de 43 kDa est attendue ; incluez des marqueurs de poids moléculaire et des contrôles de charge appropriés. La réactivité croisée avec les échantillons de souris et de rat a été confirmée, mais nous vous recommandons de vérifier les conditions optimales pour vos lysats spécifiques.
• Lors de la réalisation d'immunohistochimie ou d'immunofluorescence, optimisez la fixation (par exemple au paraformaldéhyde) et le démasquage antigénique (par exemple avec un tampon citrate) en fonction de votre type de tissu ou de cellule. Utilisez des anticorps secondaires et des contre-colorations appropriés.
• Pour l'ELISA, utilisez un protocole indirect standard et titrez l'anticorps pour déterminer la dilution de travail optimale adaptée à votre dispositif expérimental.

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