Anticorps monoclonal de lapin anti-CDK9 (Validé KO) pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P50750

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDK9

• CDK9 est une sérine/thréonine-protéine kinase qui sert de sous-unité catalytique du complexe facteur b d'élongation transcriptionnelle positive (P-TEFb). Ce complexe phosphoryle le domaine C-terminal (CTD) de l'ARN polymérase II pour promouvoir l'élongation transcriptionnelle.
  Références associées : PMID:10574912 PMID:10757782 PMID:11145967
• De plus, CDK9 forme un complexe avec la cycline-K qui présente une activité kinase envers le CTD de l'ARN polymérase II. Ce complexe est essentiel pour le maintien de l'intégrité du génome en facilitant la reprise après un arrêt de la réplication et en limitant les dommages à l'ADN.
  Références associées : PMID:20493174 PMID:21127351
• Il phosphoryle un large éventail de substrats, notamment EP300, MYOD1, AR, les facteurs d'élongation négative DSIF et NELF, et l'histone H1.4, régulant ainsi des processus divers tels que la différenciation musculaire, la signalisation du récepteur aux androgènes et la structure de la chromatine.
  Références associées : PMID:10912001 PMID:11112772 PMID:12037670 PMID:28539972
• Le P-TEFb participe également aux modifications co-transcriptionnelles des histones, au traitement des ARNm et à l'export des ARNm, établissant un lien entre l'élongation transcriptionnelle et le remodelage de la chromatine.
  Références associées : PMID:15564463 PMID:19575011 PMID:19844166
• CDK9 est impliqué dans les réseaux transcriptionnels inductibles par les cytokines, tels que l'activation de RELA/p65 induite par le TNF et la signalisation STAT3 induite par l'IL-6. Il est également associé à la pathogénèse virale et à l'hypertrophie des cardiomyocytes.
  Références associées : PMID:10393184 PMID:17956865 PMID:18362169 PMID:20081228
• La protéine se localise dans le noyau et le cytoplasme, et se trouve également dans les corps PML, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la régulation de la transcription et la réparation de l'ADN.
• CDK9 est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus, reflétant son rôle fondamental dans la transcription.
• Les fonctions supplémentaires incluent la phosphorylation de KAT5 pour promouvoir l'activité histone acétyltransférase et la modulation des modifications des histones telles que la monoubiquitination de H2B, la triméthylation de H3K4 et H3K36me3.
  Références associées : PMID:29335245 PMID:15564463

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps monoclonal a été généré contre un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 273-372 du CDK9 humain, une région probablement conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui est cohérent avec une large réactivité croisée entre espèces.
• Pour le Western blot, une bande SDS-PAGE d'environ 43 kDa est attendue pour CDK9 ; cependant, des modifications post-traductionnelles ou des variants d'épissage peuvent produire des bandes supplémentaires. Vérifiez en utilisant des contrôles négatifs appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), il est recommandé de titrer l'anticorps primaire et d'optimiser les conditions de récupération antigénique pour obtenir des rapports signal/bruit optimaux.
• La validation par knock-out indique que cet anticorps reconnaît sa cible de manière spécifique ; néanmoins, chaque laboratoire doit valider l'anticorps dans son propre contexte d'échantillons et de tests, idéalement en utilisant des contrôles de knock-out ou de knock-down.
• Cet anticorps peut être utilisé en immunoprécipitation (IP) pour enrichir le CDK9 et les complexes associés ; pour une analyse ultérieure, envisagez d'utiliser des anticorps ciblant des épitopes différents pour minimiser les interférences.

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