Anticorps monoclonal de lapin anti-CDK8 pour WB et ELISA - P49336

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDK8

• CDK8 est une kinase dépendante des cyclines et un composant central du complexe Médiateur, un coactivateur essentiel pour la transcription régulée de presque tous les gènes dépendants de l'ARN polymérase II.
• Il relie les protéines régulatrices spécifiques des gènes et la machinerie de transcription basale, en assurant l'échafaudage de l'assemblage du complexe de pré-initiation avec l'ARN polymérase II et les facteurs généraux de transcription.
• CDK8 phosphoryle le domaine C-terminal (CTD) de l'ARN polymérase II, ce qui peut inhiber la formation du complexe d'initiation de la transcription, agissant ainsi comme un répresseur transcriptionnel. Références associées : PMID:10993082
• Il phosphoryle CCNH, conduisant à une down-régulation du complexe TFIIH et à une répression transcriptionnelle. Références associées : PMID:10993082
• Par interaction avec MAML1, CDK8 hyperphosphoryle le domaine intracellulaire de NOTCH, favorisant sa dégradation. Références associées : PMID:15546612
• Il module sélectivement la réponse interféron par phosphorylation du domaine de transactivation de STAT1.
• Localisée majoritairement dans le noyau, CDK8 est une sérine/thréonine protéine kinase aux rôles d'activateur et de répresseur, et ses variants génétiques sont liés aux troubles du spectre autistique et à la déficience intellectuelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 364–464 de la CDK8 humaine, une région qui peut offrir une bonne spécificité ; pensez à vérifier l'unicité de l'épitope dans votre système d'étude.
• Pour le Western blot, optimisez la dilution de l'anticorps avec des lysats connus positifs pour CDK8 (par exemple cellules HeLa ou HEK293) et confirmez la bande attendue d'environ 53 kDa ; incluez des contrôles de charge appropriés.
• Pour l'ELISA, revêtez la plaque avec la protéine CDK8 recombinante ou des lysats cellulaires et validez la linéarité du signal sur une gamme de concentrations ; la réactivité croisée avec la CDK8 de souris permet des essais sur deux espèces.
• Comme il s'agit d'un anticorps monoclonal recombinant de lapin, vous pouvez attendre une excellente reproductibilité d'un lot à l'autre ; néanmoins, revalidez les performances lorsque vous l'appliquez à de nouvelles conditions expérimentales.
• À noter que CDK8 est impliqué dans des événements de phosphorylation dynamiques ; prévoyez des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver les états de phosphorylation.

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