PolymAb® anti-CDK4 de lapin pour WB, IP, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P11802

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDK4

• CDK4 (kinase 4 dépendante de la cycline), également appelée kinase 4 de division cellulaire ou PSK-J3, est une sérine/thréonine protéine kinase codée par le gène CDK4 chez l'homme.
• En tant que sous-unité catalytique des complexes cycline D-CDK4, CDK4 phosphoryle et inhibe les membres de la famille des protéines du rétinoblastome (RB), notamment RB1, pendant la transition G1/S du cycle cellulaire.
• La phosphorylation de RB1 par CDK4 libère les facteurs de transcription E2F, permettant la transcription des gènes requis pour l'entrée en phase S et la progression du cycle cellulaire.
• CDK4 phosphoryle également SMAD3 de manière dépendante du cycle cellulaire, réprimant son activité transcriptionnelle et intégrant les signaux mitogènes et antimitogènes.
• La localisation subcellulaire inclut le cytoplasme, le noyau et la membrane nucléaire ; la translocation dans le noyau est facilitée par le complexe ternaire cycline D/CDK4/CDKN1B.
• Les mots-clés d'UniProt soulignent ses rôles dans la liaison à l'ATP, le cycle cellulaire, la division cellulaire, et sa régulation par acétylation et phosphorylation ; les variants pathogènes sont liés au cancer.
• Le poids moléculaire prédit est d'environ 34 kDa (UniProt : 33,7 kDa), et l'épissage alternatif peut générer des isoformes supplémentaires.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux acides aminés 204-303 de la CDK4 humaine. Assurez-vous que l'épitope cible est accessible dans votre format de test ; des conditions dénaturantes et réductrices peuvent être requises pour le Western blot.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 34 kDa est attendue dans les lysats de lignées cellulaires humaines, de souris ou de rat ; confirmez la spécificité de la bande à l'aide de contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En immunoprécipitation (IP), optimisez les rapports anticorps/lysat et incluez un anticorps de contrôle pertinent pour évaluer l'efficacité de la purification par affinité.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC) et l'immunohistochimie (IHC-P), validez les profils de coloration par rapport aux distributions subcellulaires connues de CDK4 (nucléaire et cytoplasmique) dans les cellules en prolifération.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter un appariement avec un anticorps de détection adapté et des courbes d'étalonnage utilisant la protéine CDK4 recombinante.
• Réalisez toujours des expériences de titrage préliminaires pour déterminer les concentrations de travail optimales pour vos échantillons et protocoles spécifiques.

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