Anticorps polyclonal anti-CDK4 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P11802

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CDK4

• CDK4 (kinase 4 dépendante des cyclines), également connue sous le nom de kinase 4 de la division cellulaire ou PSK-J3, est une sérine/thréonine-protéine kinase codée par le gène CDK4. Elle constitue un composant clé des complexes cycline D-CDK4 qui régulent la progression du cycle cellulaire.
• En tant que partie du complexe cycline D-CDK4, CDK4 phosphoryle et inhibe les membres de la famille de protéines du rétinoblastome (RB), notamment RB1, lors de la transition G1/S. Cette phosphorylation entraîne la dissociation du facteur de transcription E2F des complexes RB/E2F, permettant la transcription des gènes cibles d'E2F nécessaires à la progression de la phase G1.
• CDK4 hypophosphoryle RB1 au début de la phase G1 et sert de principal intégrateur de divers signaux mitogènes et antimitogènes grâce à son activité au sein du complexe cycline D-CDK4.
• CDK4 phosphoryle également SMAD3 de manière dépendante du cycle cellulaire, réprimant ainsi son activité transcriptionnelle et mettant en évidence son rôle au-delà de la régulation de RB.
• CDK4 forme un complexe ternaire avec la cycline D et CDKN1B (p27), nécessaire à la translocation nucléaire et à l'activité du complexe cycline D-CDK4.
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau et la membrane nucléaire, ce qui reflète son rôle dynamique dans la régulation du cycle cellulaire.
• Les mots-clés d'UniProt indiquent une implication dans l'acétylation, l'épissage alternatif, la liaison à l'ATP, le cycle cellulaire, la division cellulaire et les variants associés aux maladies ; il s'agit d'une phosphoprotéine liée à des voies impliquées dans le cancer.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 200 à 303 du CDK4 humain, une région proche de l'extrémité C-terminale. Cet épitope peut influencer la reconnaissance dans certaines applications ; envisagez une validation dans le contexte expérimental spécifique.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 34 kDa est attendue. Validez le résultat sur des lysats cellulaires humains et murins exprimant CDK4, car une réactivité croisée est rapportée pour ces deux espèces.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), examinez les profils de marquage cytoplasmique et nucléaire, conformément à la localisation subcellulaire de CDK4. Incluez des étapes appropriées de fixation et de perméabilisation.
• L'immunoprécipitation (IP) avec cet anticorps polyclonal peut enrichir les complexes de CDK4 ; envisagez de vérifier la co-précipitation de la cycline D ou de CDKN1B si vous étudiez le complexe ternaire.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être vérifiée pour les dosages quantitatifs tels que l'ELISA. Réalisez des expériences de titrage afin de déterminer les dilutions de travail optimales.

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