Anticorps Monoclonal Anti-CDC27 pour WB, ELISA - P30260

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du CDC27

• Le CDC27, également connu sous le nom d'APC3 ou d'ANAPC3, est une sous-unité centrale du complexe promoteur de l'anaphase/cyclosome (APC/C), une grande E3 ligase d'ubiquitine essentielle pour la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:18485873 PMID:27120157 PMID:27509861
• L'APC/C médie l'ubiquitination des protéines cibles, formant principalement des chaînes de polyubiquitine liées par la Lys-11, mais aussi des chaînes liées par la Lys-48 et la Lys-63, ainsi que des chaînes branchées Lys-11/Lys-48, pour déclencher la dégradation par le protéasome. Références associées : PMID:18485873 PMID:29033132
• Pendant la transition métaphase-anaphase, l'APC/C est activé par CDC20, conduisant à la dégradation de la cycline B et de la sécurine, entraînant ainsi la ségrégation des chromosomes et la sortie de la mitose. Références associées : PMID:27120157 PMID:27509861
• L'activité de l'APC/C est étroitement régulée par le complexe du point de contrôle mitotique (MCC), qui inhibe l'APC/C jusqu'à ce que tous les chromosomes soient correctement attachés au fuseau, empêchant ainsi le début prématuré de l'anaphase. Références associées : PMID:27509861
• Le CDC27 se localise dans le noyau, le cytoplasme et le fuseau mitotique, ce qui est cohérent avec ses rôles dynamiques dans les points de contrôle du cycle cellulaire et la dynamique des chromosomes.
• La protéine contient des répétitions TPR et est sujette à la phosphorylation, soulignant ses interactions régulatrices et son contrôle post-traductionnel au sein de l'holoenzyme APC/C.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, élargissant la diversité fonctionnelle du CDC27 dans différents contextes cellulaires.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 702 à 824 du CDC27 humain, une région probablement exposée sur la protéine native ; cette conception peut favoriser la détection des formes endogènes et recombinantes en WB.
• En WB, une bande proche de 92 kDa est attendue ; confirmez la spécificité à l'aide de témoins positifs (par exemple, lysat de cellules HeLa) et négatifs appropriés, et envisagez d'utiliser un témoin de chargement.
• Pour les applications ELISA, validez la liaison contre la région de l'épitope spécifique ou le CDC27 de pleine longueur pour assurer la sensibilité et la spécificité de l'essai.
• Une réactivité croisée avec le CDC27 de souris est indiquée ; testez sur des échantillons de tissus ou de lignées cellulaires de souris pertinentes si vous ciblez des orthologues murins.

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