Anticorps polyclonal anti-CDC20 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q12834

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDC20

• CDC20 est un adaptateur spécifique de substrat et un activateur du complexe promoteur de l'anaphase/cyclosome (APC/C), qui cible les substrats pour l'ubiquitination et la dégradation. Références associées : PMID:9734353 PMID:27030811 PMID:29343641

• Il est essentiel pour la transition métaphase/anaphase en ciblant la cycline B et la sécurine pour leur dégradation. Références associées : PMID:27120157 PMID:27509861 PMID:32666501

• Il reconnaît les motifs boîte de destruction (boîte D), boîte KEN et ABBA sur les substrats, permettant une reconnaissance spécifique. Références associées : PMID:29343641 PMID:27509861

• C'est un composant du complexe de point de contrôle mitotique (MCC), qui inhibe l'APC/C jusqu'à ce que les chromosomes soient correctement attachés au fuseau mitotique. Références associées : PMID:27509861

• Le MCC comprend CDC20, MAD2L1, BUB1B et BUB3 ; il retarde la transition métaphase/anaphase. Références associées : PMID:9811605 PMID:9637688 PMID:27509861

• Lorsque le point de contrôle du fuseau est inactivé, CDC20 s'auto-ubiquitine dans le MCC, réactivant l'APC/C pour l'anaphase. Références associées : PMID:27509861

• Au niveau sous-cellulaire, CDC20 se localise dans le cytoplasme, le centrosome, le kinétochore et le pôle du fuseau pendant la mitose.

• CDC20 contient des répétitions WD et est régulée par acétylation, phosphorylation et ubiquitination ; des mutations sont associées à des pathologies.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène (acides aminés 1–270) couvre la région N-terminale, qui peut être impliquée dans la reconnaissance des substrats ; l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes natives et dénaturées de la protéine.
• Pour le Western blot, une bande proche de 55 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des lysats de cellules en mitose pour enrichir CDC20.
• En immunofluorescence, un marquage devrait être observé sur les structures mitotiques comme les kinétochores et les pôles du fuseau ; validez l'expérience sur des cellules synchronisées.
• La réactivité croisée avec la souris permet des études sur des modèles murins ; vérifiez la réactivité pour votre souche spécifique si nécessaire.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et la titration de l'anticorps en fonction de votre format d'essai.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre est possible ; incluez des contrôles adaptés et envisagez une purification par affinité si nécessaire.

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