Anticorps monoclonal de lapin anti-CDC16 pour IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13042

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDC16

• CDC16 (APC6) est une sous-unité centrale du complexe promoteur de l'anaphase/cyclosome (APC/C), une ubiquitine ligase E3 multi-sous-unités essentielle à la progression du cycle cellulaire. Références associées : PMID:18485873
• L'APC/C médie l'ubiquitination puis la dégradation protéasomale des régulateurs clés du cycle cellulaire, catalysant principalement les chaînes polyubiquitines liées au niveau de la Lys-11, et dans une moindre mesure les chaînes liées au niveau de la Lys-48 et de la Lys-63. Il peut également assembler des chaînes ramifiées Lys-11/Lys-48 sur les substrats. Références associées : PMID:18485873, PMID:29033132
• L'activation de l'APC/C par CDC20 en métaphase déclenche la dégradation de la sécurine et de la cycline B, favorisant la transition vers l'anaphase et la sortie de la mitose. Références associées : PMID:27120157, PMID:27509861
• L'activité de l'APC/C est inhibée par le complexe du point de contrôle mitotique (MCC) pour garantir une ségrégation correcte des chromosomes jusqu'à ce que tous les kinétochores soient correctement attachés. Références associées : PMID:27509861
• CDC16 se localise dans le cytoplasme, les centrosomes et le fuseau mitotique pendant la division cellulaire, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation mitotique.
• CDC16 appartient à une famille de sous-unités de l'APC/C caractérisée par des domaines de répétition tétratricopeptide (TPR) qui médient les interactions protéine-protéine.
• La protéine subit une phosphorylation, qui pourrait réguler son activité ou ses interactions au sein du complexe.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 200 à 300 de la CDC16 humaine. Cette séquence interne peut être adaptée pour détecter la CDC16 pleine longueur dans des applications de western blot. Bien que celle-ci ne figure pas dans la liste des applications standard, pensez à la valider pour l'analyse de protéines dénaturantes compte tenu du poids moléculaire prédit d'environ 72 kDa.
• Pour l'IHC-P, envisagez d'utiliser un démasquage antigénique induit par la chaleur (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) et optimisez la concentration de l'anticorps primaire.
• En IF/ICC, assurez une fixation correcte (par exemple, paraformaldéhyde à 4 %) et une perméabilisation pour permettre l'accès à la CDC16 cytoplasmique et centrosomique.
• ELISA peut être utilisée pour quantifier CDC16 ; étalez l'anticorps par titrage et validez la réactivité croisée avec votre espèce cible (humain, souris, rat).

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