Anticorps monoclonal de lapin anti-CD99 pour WB, IF/ICC, IHC-P, FC, ELISA - P14209

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD99

• CD99, également connu sous le nom de MIC2, HBA71, MIC2X, MIC2Y, MSK5X, est une glycoprotéine de surface cellulaire codée par le gène CD99 (également appelé MIC2, MIC2X, MIC2Y). Il a été initialement identifié comme l'antigène E2 sur les lymphocytes T.
• La protéine est impliquée dans les processus d'adhésion des lymphocytes T et dans la formation spontanée de rosettes avec les érythrocytes, jouant un rôle dans une étape tardive de l'extravasation des leucocytes en les aidant à franchir la membrane basale endothéliale, agissant indépendamment de PECAM1.
• CD99 subit un épissage alternatif, produisant plusieurs isoformes pouvant avoir des fonctions distinctes.
• Localisation subcellulaire : CD99 est une protéine transmembranaire principalement localisée sur la membrane plasmique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler ses fonctions adhésives.
• La protéine de base a un poids moléculaire prédit d'environ 18,8 kDa, mais en raison de la glycosylation, elle migre à 16-19 kDa en SDS-PAGE.
• CD99 est exprimé dans un large éventail de cellules hématopoïétiques et est utilisé comme marqueur diagnostique pour le sarcome d'Ewing et les tumeurs neuroectodermiques primitives.

Guide expérimental et conseils techniques

• Étant donné que l'immunogène correspond au domaine extracellulaire N-terminal (acides aminés 24-123), l'anticorps est susceptible de reconnaître la forme native et non perméabilisée de CD99, le rendant adapté à la coloration de surface en cytométrie en flux et en immunofluorescence.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande autour de 16-19 kDa ; l'utilisation de conditions réductrices peut aider à séparer les formes glycosylées. Validez la spécificité avec des lignées cellulaires positives et négatives ou une extinction par siRNA.
• En IHC-P, une récupération antigénique (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur dans un tampon citrate) peut améliorer la détection ; un titrage est recommandé.
• Pour l'IF/ICC, la coloration sur cellules fixées et vivantes peut être testée ; si une fixation est utilisée, une perméabilisation douce peut être optionnelle puisque l'épitope est extracellulaire.
• Toujours inclure des contrôles isotypiques appropriés et confirmer la réactivité croisée uniquement avec l'humain, conformément aux spécifications du produit.

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