Anticorps polyclonal anti-CD99 pour WB, ELISA - P14209

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD99

• CD99, également appelé MIC2 ou glycoprotéine E2 de surface des lymphocytes T, est une protéine transmembranaire fortement glycosylée appartenant à la famille CD99. Elle est soumise à un épissage alternatif, générant de multiples isoformes.
• La protéine est principalement exprimée à la surface des lymphocytes T, où elle médie l'adhésion cellulaire. Elle est impliquée dans la formation spontanée de rosettes entre lymphocytes T et érythrocytes, un phénomène immunologique classique.
• CD99 joue un rôle critique dans l'extravasation leucocytaire, spécifiquement lors de l'étape où les leucocytes transmigrent à travers la membrane basale endothéliale. Il agit au même endroit que PECAM-1 mais indépendamment de celui-ci.
• La protéine est localisée dans la membrane plasmique en tant que protéine transmembranaire de type I, avec un domaine extracellulaire qui médie les interactions adhésives et une courte queue cytoplasmique impliquée dans la signalisation.
• CD99 est soumise à des modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation et une glycosylation extensive, qui modulent sa fonction et son poids moléculaire. La glycoprotéine mature migre à environ 32 kDa sur SDS-PAGE, bien que le poids de la protéine core soit d'environ 19 kDa.
• Les études structurales (structure 3D) ont permis de mieux comprendre la base moléculaire de l'adhésion médiée par CD99, et le séquençage direct de la protéine a confirmé son identité et son maturation.
• Bien qu'il soit mieux caractérisé dans les lymphocytes T, CD99 est également exprimé sur d'autres leucocytes et les cellules endothéliales, contribuant à la surveillance immunitaire et aux réponses inflammatoires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène de cet anticorps polyclonal correspond à la région extracellulaire N-terminale (aa 23–124), qui inclut une partie du domaine d'adhésion. Pour le WB, cet anticorps peut détecter des bandes correspondant à des isoformes glycosylées différemment ; nous recommandons d'utiliser une étape de déglycosylation pour confirmer la taille de la protéine core.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour capturer ou détecter le CD99 natif dans des lysats cellulaires ou des préparations de protéines purifiées. L'optimisation des conditions de revêtement et de blocage est recommandée pour minimiser la liaison non spécifique.
• Pour la coloration de tissus ou de cellules, validez l'anticorps dans votre système d'échantillon humain pertinent (par ex. lymphocytes T Jurkat, cellules mononucléées du sang périphérique) et incluez des contrôles appropriés tels que l'IgG de même isotype ou des échantillons bloqués par peptide pour confirmer la spécificité.

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