Anticorps monoclonal anti-CD95/FAS pour WB, IF/ICC, ELISA - P25445

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD95/FAS

• CD95/FAS est un membre de la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale (TNFRSF6), également appelé antigène Apo-1 ou antigène de surface FAS médiateur de l'apoptose.
• Il fonctionne comme récepteur pour TNFSF6/FASLG : après liaison au ligand, il recrute FADD et la caspase-8 pour former le complexe de signalisation induisant la mort (DISC), initiant l'apoptose.
• L'apoptose médiée par FAS joue un rôle dans l'induction de la tolérance périphérique et le suicide des lymphocytes T matures stimulés par l'antigène.
• Le gène produit plusieurs isoformes par épissage alternatif ; les isoformes sécrétées 2 à 6 peuvent bloquer l'apoptose in vitro.
• La localisation subcellulaire inclut la membrane cellulaire, les radeaux lipidiques membranaires et les formes sécrétées ; la localisation spécifique à l'isoforme influence la signalisation.
• Dans les cellules mononucléées du sang périphérique au repos, l'isoforme 1 et l'isoforme 6 sont exprimées de manière égale ; après activation, l'isoforme 1 augmente tandis que l'isoforme 6 diminue.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la palmitoylation, la phosphorylation et la formation de ponts disulfures, qui contribuent à la fonction et à la stabilité du récepteur.
• Les mutations du gène FAS sont associées au syndrome lymphoprolifératif auto-immun (ALPS), ce qui démontre son rôle essentiel dans l'homéostasie immunitaire.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (aa 26-173), l'anticorps est donc supposé reconnaître les isoformes membranaires et potentiellement sécrétées de CD95/FAS.
• Pour le Western blot, attendez plusieurs bandes entre 9 et 38 kDa du fait de l'épissage alternatif, de la glycosylation et du clivage ; pensez à utiliser des conditions réductrices et des marqueurs de poids moléculaire adaptés.
• En IF/ICC, CD95/FAS se localise principalement sur la membrane plasmique et les radeaux lipidiques membranaires ; assurez-vous d'optimiser la perméabilisation si vous détectez des pools intracellulaires.
• Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon spécifique, car les niveaux d'expression peuvent varier selon le type de cellule et l'état d'activation.

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