Anticorps monoclonal de lapin anti-CD95 pour ELISA, FC - P25446

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CD95

• CD95 (FAS, Apo-1) est un membre de la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale, une protéine transmembranaire qui médie l’apoptose lors de sa liaison à son ligand FASLG.
• Le domaine de mort intracellulaire du récepteur recrute FADD et la caspase-8, formant le complexe de signalisation inducteur de la mort (DISC), qui déclenche les cascades apoptotiques.
• L’apoptose médiée par FAS est essentielle à la tolérance périphérique et à l’élimination par apoptose des lymphocytes T matures stimulés par les antigènes.
• Localisé dans la membrane cellulaire et les radeaux membranaires, CD95 est exprimé dans divers tissus de souris, notamment le thymus, le foie, les poumons, le cœur et l’ovaire adulte.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la lipidation (palmitate) et la phosphorylation ; la protéine contient des ponts disulfure et un peptide signal.
• La protéine mature a un poids moléculaire prédit d’environ 37 kDa, qui peut sembler plus élevé dans des conditions réductrices en raison de la glycosylation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène (aa 22-169) couvre le domaine extracellulaire, ce qui rend cet anticorps adapté à la détection de CD95 de surface dans des conditions natives et dénaturantes.
• Pour l’ELISA, envisagez un revêtement avec une protéine de fusion CD95-Fc recombinante ou l’utilisation de lysats cellulaires ; commencez par titrer l’anticorps entre 0,1 et 1 µg/mL.
• En cytométrie en flux, utilisez 0,5 à 2 µg pour 10^6 cellules ; incluez des contrôles isotypiques appropriés et des étapes de blocage afin de minimiser la liaison non spécifique.
• Validez la spécificité de l’anticorps à l’aide de modèles de souris ou de lignées cellulaires knockout pour CD95 afin de confirmer la reconnaissance de la cible.
• Notez que les niveaux d’expression endogène de CD95 varient selon les tissus et les états d’activation ; des expériences préliminaires sont recommandées.

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