Anticorps polyclonal de lapin anti-CD90.1 pour WB, ELISA - P01831

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la glycoprotéine membranaire Thy-1

• La glycoprotéine membranaire Thy-1, également appelée CD90, est une protéine de surface cellulaire ancrée par GPI appartenant à la superfamille des immunoglobulines.
• Chez la souris, Thy-1 existe sous deux variants alléliques majeurs, Thy1.1 (CD90.1) et Thy1.2 (CD90.2) ; cet anticorps cible l'allèle CD90.1, comme l'indique la conception de son immunogène.
• Thy-1 peut médier les interactions cellule-cellule ou cellule-ligand, notamment pendant la synaptogenèse et d'autres processus cérébraux (d'après l'annotation fonctionnelle d'UniProt).
• La protéine est localisée sur la membrane cellulaire et est fixée par un ancrage glycosylphosphatidylinositol (GPI), qui la cible vers les radeaux lipidiques.
• Elle contient un seul domaine de type V immunoglobuline, comporte une liaison disulfure et subit des modifications post-traductionnelles incluant la glycosylation et la formation d'acide pyrrolidone carboxylique N-terminal.
• La protéine mature a un poids moléculaire d'environ 18 kDa (d'après l'entrée UniProt), ce qui est cohérent avec la bande observée d'environ 18 kDa en SDS-PAGE dans des conditions réductrices.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps polyclonal de lapin a été obtenu contre une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 20-120 du CD90.1 de souris (NP_033408.1), qui inclut le domaine extracellulaire de type immunoglobuline.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 18 kDa est attendue dans les tissus de souris ou les lignées cellulaires exprimant le CD90.1 ; nous recommandons d'inclure des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des tissus de souris de souche Thy1.1 par rapport à Thy1.2).
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme anticorps de capture ou de détection ; les concentrations de revêtement et les titres optimaux doivent être déterminés de manière empirique.
• Les anticorps polyclonaux peuvent présenter une variabilité d'un lot à l'autre ; nous recommandons de valider chaque nouveau lot dans le système d'essai prévu.
• La localisation de Thy-1 à la surface cellulaire via l'ancre GPI peut nécessiter des conditions de lyse douces pour préserver la solubilité ; envisagez d'utiliser des détergents non dénaturants si vous réalisez un fractionnement membranaire.
• La spécificité de l'anticorps peut être confirmée par immunoprécipitation couplée à la spectrométrie de masse ou par test sur des lysats de cellules/tissus knock-out pour CD90.1 si disponibles.
• Conservez-le comme recommandé (expédition en sac de glace ; stockage à long terme à -20°C ou -80°C) et évitez les cycles de congélation-décongélation répétés pour préserver l'activité.

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