Anticorps polyclonal anti-CD8A pour WB, IHC-P, ELISA - P01732

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD8A

• CD8A code pour la chaîne alpha de la glycoprotéine de surface des lymphocytes T CD8, également connue sous le nom de T8/Leu-2, qui est un corécepteur pour les molécules du CMH de classe I. La protéine CD8 existe soit sous forme d'un hétérodimère lié par des ponts disulfure des chaînes alpha/CD8A et bêta/CD8B, soit moins communément sous forme d'un homodimère CD8A.
• CD8A est essentiel pour la réponse immunitaire. Dans les lymphocytes T, il interagit avec le récepteur des cellules T (TCR) et les complexes CMH de classe I:peptide sur les cellules présentatrices d'antigène, recrutant la kinase Src LCK pour initier des voies de signalisation conduisant à l'activation, la prolifération et la différenciation des lymphocytes T en lymphocytes T cytotoxiques (CTL).
• CD8A permet aux CTL de reconnaître et d'éliminer les cellules infectées et tumorales. La cascade de signalisation intracellulaire déclenchée par la phosphorylation CD8A-LCK favorise la production de lymphokines, la motilité, l'adhésion et la lyse des cellules cibles.
• Sur les cellules tueuses naturelles (NK), les homodimères CD8A fournissent un mécanisme de survie qui facilite la conjugaison et la lyse de multiples cellules cibles. Les homodimères CD8A soutiennent également la survie et la différenciation des lymphocytes activés en lymphocytes T CD8+ mémoire.
• CD8A est exprimé sur les lymphocytes T dérivés du thymus, un sous-ensemble de cellules NK, les lymphocytes T mémoire, les lymphocytes intra-épithéliaux, les monocytes et les cellules dendritiques. Son expression peut être induite sur les cellules dendritiques plasmacytoïdes après stimulation par le virus de l'herpès simplex-1.
• La protéine est une glycoprotéine membranaire intégrale avec un seul domaine transmembranaire et une forme sécrétée produite par épissage alternatif. Elle contient un domaine de type immunoglobuline et est modifiée par des ponts disulfure, une palmitoylation et une glycosylation N-liée.
• Les mots-clés associés à CD8A incluent l'immunité adaptative, l'épissage alternatif, la membrane cellulaire, le variant de maladie (l'impliquant dans l'immunodéficience), la liaison disulfure, la glycoprotéine, le domaine immunoglobuline, la lipoprotéine, le palmitate, sécrété et l'hélice transmembranaire.
• Le poids moléculaire de la protéine mature est d'environ 25,7 kDa, ce qui correspond à la taille de bande observée de 26 kDa dans des conditions réductrices lors d'une analyse par Western blot.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps polyclonal correspond aux acides aminés 22-182 du CD8A humain, qui couvre le domaine extracellulaire de type immunoglobuline. Cette région est très probablement accessible à la surface cellulaire, ce qui rend l'anticorps adapté aux applications reconnaissant la protéine native.
• Pour le Western blot (WB), une bande autour de 26 kDa est attendue. L'anticorps peut détecter les formes glycosylées et non glycosylées. Des conditions réductrices sont recommandées pour résoudre le monomère.
• Pour l'immunohistochimie sur coupes paraffinées (IHC-P), les conditions optimales de récupération antigénique (par exemple, tampon citrate, pH 6,0) doivent être déterminées empiriquement. La nature polyclonale peut fournir une forte amplification du signal mais pourrait aussi augmenter le bruit de fond ; les étapes de blocage doivent être optimisées.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il reconnaît plusieurs épitopes, ce qui peut être avantageux pour les tests ELISA, pouvant potentiellement servir à la fois de réactif de capture et de détection. L'adsorption croisée contre les protéines de souris assure sa réactivité avec le CD8A de souris, élargissant son utilité dans les études sur modèles murins.

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