Anticorps polyclonal de lapin anti-CD74 pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04233

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD74

• CD74, également connu sous le nom de chaîne gamma de l'antigène d'histocompatibilité de classe II du HLA ou chaîne invariante (Ii), est une chaperonne essentielle dans le processus de traitement et de présentation des antigènes du CMH de classe II. Il agit comme récepteur de surface cellulaire pour le facteur inhibiteur de la migration des macrophages (MIF).
• La protéine se lie au site de liaison aux peptides des hétérodimères alpha/bêta du CMH de classe II, formant un complexe alpha-bêta-CLIP qui empêche le chargement prématuré du peptide jusqu'à ce que le HLA-DM facilite la libération de CLIP dans l'endosome.
• CD74 stabilise la conformation de la cathepsine L mature (CTSL) en se liant à son site actif, agissant comme une chaperonne pour maintenir un pool d'enzyme active dans les compartiments endocytiques et l'espace extracellulaire des cellules présentatrices d'antigène.
• L'isoforme p41 de CD74 présente une activité antivirale en bloquant l'entrée endosomique du virus Ebola et des coronavirus, y compris le SARS-CoV-2, en perturbant le traitement de la glycoprotéine virale médié par la cathepsine. Références associées : PMID:32855215
• Subcellulairement, CD74 se trouve sur la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, le réseau trans-Golgien, les endosomes et les lysosomes ; il est également sécrété.
• Chez les lymphocytes B, deux isoformes majeures représentent environ 10 % et 70 % de l'expression totale de CD74, respectivement.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la glycosylation, l'attachement de protéoglycanes et la formation de ponts disulfure, comme indiqué dans l'annotation UniProt.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 73-232 du CD74 humain (NP_004346.1), couvrant la région CLIP ; vérifiez la conservation de la séquence si vous utilisez l'anticorps sur des espèces autres que l'homme et le rat.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est de 34 kDa, mais la glycosylation et les variants d'isoforme peuvent entraîner des décalages de bande ; validez la détection dans votre système expérimental.
• En immunohistochimie sur paraffine (IHC-P), pensez à optimiser les protocoles de récupération d'antigène, car CD74 est localisé dans de multiples compartiments intracellulaires.
• Pour l'immunofluorescence / immunocytochimie (IF/ICC), les conditions de perméabilisation doivent être testées en raison de la localisation combinée de CD74 à la membrane et intracellulaire.
• Lors de l'utilisation d'ELISA, notez que CD74 peut être sécrété ; une préparation d'échantillon adaptée et une validation du test sont recommandées.

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