Anticorps polyclonal anti-CD73/NT5E pour WB, IHC-P et ELISA - P21589

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CD73/NT5E

• CD73/NT5E code pour l'enzyme ecto-5'-nucléotidase, une protéine de membrane cellulaire ancrée par glycosylphosphatidylinositol (GPI) qui catalyse l'hydrolyse des nucléotides monophosphates extracellulaires, libérant du phosphate inorganique et le nucléoside correspondant.
• L'enzyme hydrolyse préférentiellement l'AMP, mais accepte également l'IMP, l'UMP, le GMP, le CMP, le dAMP, le dCMP, le dTMP, le NAD et le NMN comme substrats. Références associées : PMID:21933152, PMID:22997138, PMID:23142347
• CD73 montre une préférence pour les monophosphates de ribonucléotides par rapport à leurs formes désoxyribose équivalentes. Références associées : PMID:34403084
• La protéine est ancrée au feuillet externe de la membrane plasmique via un groupement GPI et contient des ponts disulfure, des sites de glycosylation N-liés et un site de liaison du zinc qui sont essentiels à son intégrité structurelle et à son activité catalytique.
• L'épissage alternatif du gène NT5E produit plusieurs isoformes, qui peuvent différer par leurs propriétés enzymatiques ou leur distribution subcellulaire.
• La fiche UniProt liste 'Variant de maladie' comme mot-clé, suggérant que des mutations dans NT5E pourraient être associées à des maladies humaines.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond au domaine extracellulaire (acides aminés 32-264), suggérant que l'anticorps peut reconnaître le CD73 natif à la surface cellulaire dans des cellules et tissus intacts.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande proche de 63 kDa ; cependant, la glycosylation N-liée peut entraîner une migration à un poids moléculaire apparent plus élevé ; validez dans votre système d'échantillon spécifique.
• En immunohistochimie (IHC-P), considérez les conditions de démasquage antigénique et incluez des témoins positifs et négatifs appropriés, en particulier dans les tissus connus pour exprimer CD73 comme le placenta, le rein et les organes lymphoïdes.
• Une réactivité croisée avec le CD73 de souris et de rat est rapportée ; vérifiez les bandes attendues chez ces espèces si vous utilisez des échantillons non humains.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; associez-le avec un anticorps monoclonal validé ou un autre lot pour l'optimisation d'un ELISA sandwich.

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