Anticorps monoclonal lapin anti-CD69 pour WB, ELISA - Q07108

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD69

• Le CD69 est un récepteur de lectine de type C transmembranaire de type II, également connu sous les noms d'AIM, EA1, MLR-3, CLEC2C, GP32/28, BL-AC/P26 et Leu-23. Il est rapidement régulé à la hausse à la surface des cellules T activées, des cellules B, des cellules natural killer, des neutrophiles, des éosinophiles, des cellules de Langerhans épidermiques et des plaquettes.
• Il régule négativement la différenciation des cellules Th17 par une interaction dépendante des glucides avec la galectine-1/LGALS1 sur les cellules dendritiques immatures. Références connexes : PMID:24752896
• Le CD69 coopère avec le complexe S100A8/S100A9 présent sur les cellules mononucléaires du sang périphérique pour favoriser la conversion des cellules T CD4 naïves en cellules T régulatrices. Références connexes : PMID:26296369
• En tant que récepteur des lipoprotéines de basse densité oxydées (oxLDL) dans les lymphocytes T CD4, il régule négativement l'inflammation en induisant l'expression de PDCD1 par l'activation de NFAT. Références connexes : PMID:35930205
• Dans les cellules souches mésenchymateuses dérivées du tissu adipeux (ASC), le CD69 reconnaît spécifiquement P. aeruginosa et déclenche l'activation d'ERK1, entraînant la sécrétion de facteur stimulant les colonies de granulocytes et de macrophages (GM-CSF) et de cytokines inflammatoires, contribuant ainsi à la défense de l'hôte. Références connexes : PMID:34841721
• Le CD69 régule négativement les réponses chimiotactiques des lymphocytes effecteurs et des cellules dendritiques au sphingosine 1-phosphate (S1P) en agissant comme un agoniste du S1PR1 et en facilitant l'internalisation et la dégradation du récepteur. Références connexes : PMID:37039481
• La protéine réside principalement sur la membrane cellulaire sous forme d'homodimère lié par des ponts disulfures et subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation et la phosphorylation.
• Elle est exprimée sur divers sous-ensembles de cellules immunitaires et joue un rôle dans la production d'IL-10 par les éosinophiles via la voie ERK1/2, bien qu'une validation supplémentaire dans des modèles spécifiques soit recommandée.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène englobe les acides aminés 62 à 199 du CD69 humain (NP_001772.1), correspondant au domaine extracellulaire. Cette région est conservée entre l'humain et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le western blot (WB), une bande d'environ 23 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; cependant, en raison de la glycosylation, un poids moléculaire plus élevé peut être observé. Incluez des témoins positifs et négatifs appropriés dans votre conception expérimentale.
• Dans les applications ELISA, envisagez des formats direct, indirect ou sandwich en fonction des exigences de l'essai. Effectuez une titration de l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre protocole spécifique.
• Comme le CD69 est exprimé de manière transitoire lors de la stimulation, l'activation des cellules cibles (par exemple, avec PMA/ionomycine pour les cellules T) peut être nécessaire pour détecter la protéine. Validez les conditions de détection dans vos échantillons biologiques pertinents.

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