Anti-CD68 Rabbit PolymAb® pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34810 / P31996

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD68

• La macrosialine (CD68) est une glycoprotéine transmembranaire fortement glycosylée appartenant à la famille des protéines membranaires associées aux lysosomes (LAMP), également connue sous le nom de Lamp4, gp110 et Scard1. La protéine principale a un poids moléculaire calculé d'environ 37 kDa, mais une glycosylation étendue par des liaisons N et O produit une taille apparente de 70 à 130 kDa sur SDS-PAGE.
• Le CD68 est principalement exprimé sur les membranes endosomales et lysosomales des monocytes et des macrophages tissulaires, où il participe à la phagocytose et au métabolisme lysosomal intracellulaire.
• En se liant à des lectines ou des sélectines spécifiques de tissus et d'organes, le CD68 facilite l'homing des macrophages vers les sites d'inflammation ou de blessure et peut permettre la migration cellulaire sur des substrats enrobés de sélectines grâce à un recyclage rapide entre les compartiments endolysosomaux et la membrane plasmique.
• En plus des macrophages, le CD68 est exprimé à des niveaux plus faibles dans les lymphocytes, les fibroblastes, les cellules endothéliales et de nombreuses lignées cellulaires tumorales, aidant potentiellement l'attachement des cellules tumorales à l'endothélium vasculaire et la dissémination métastatique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la formation de ponts disulfures, une forte glycosylation et un peptide signal clivable, contribuant à sa maturation et son trafic membranaire.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de CD68, et son répertoire fonctionnel est encore élargi par des interactions avec des composants de la matrice extracellulaire et des récepteurs d'adhésion cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante couvrant à la fois le CD68 humain et murin, suggérant une large réactivité croisée ; néanmoins, les chercheurs doivent valider la réactivité dans leurs systèmes d'échantillons spécifiques.
• Pour le Western blot (WB), une bande large entre 70 et 130 kDa est attendue en raison de la glycosylation variable ; incluez un témoin positif tel que des lysats de macrophages et envisagez d'utiliser des gels SDS-PAGE à 8–12 % pour une résolution optimale.
• En IHC-P et IF/ICC, une détection efficace peut nécessiter une récupération de l'antigène (par chaleur ou enzymatique) et des étapes de perméabilisation pour accéder à la localisation endosomale/lysosomale intracellulaire.
• Pour ELISA, le couplage avec un anticorps de détection compatible est essentiel ; CamelBio propose des paires d'anticorps validées pour soutenir le développement rapide de tests.
• Comme le CD68 est un marqueur de macrophages bien établi, le double marquage avec d'autres marqueurs de lignée (par exemple, CD163, CD11b) peut aider à délimiter les sous-ensembles de macrophages dans les coupes de tissus.

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