Anticorps polyclonal de lapin anti-CD68 pour WB, IF/ICC, ELISA - P34810

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CD68

• Le CD68, également connu sous le nom de macrosialine, GP110, LAMP4 ou SCARD1, est une glycoprotéine transmembranaire fortement glycosylée appartenant à la famille des LAMP.
• Il est principalement exprimé sur la membrane des endosomes et des lysosomes, mais peut également recycler rapidement vers la surface cellulaire, suggérant un rôle dans l'adhésion et la motilité cellulaire.
• Le CD68 fonctionne dans les activités phagocytaires des macrophages, participant à la fois au métabolisme lysosomal intracellulaire et aux interactions cellule-cellule et cellule-pathogène extracellulaires.
• En se liant à des lectines ou des sélectines spécifiques de tissus et d'organes, le CD68 facilite l'homing de sous-ensembles de macrophages vers des sites anatomiques spécifiques.
• La protéine contient un domaine de type mucine qui est probablement impliqué dans la liaison du ligand et peut médier l'attachement aux sélectines sur les cellules endothéliales, aidant à la dissémination des macrophages et des cellules tumorales.
• Le CD68 est fortement exprimé dans les monocytes sanguins et les macrophages tissulaires, et se trouve également dans les lymphocytes, les fibroblastes, les cellules endothéliales et diverses lignées cellulaires tumorales.
• De multiples modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation N-liée et les ponts disulfure, contribuent à sa stabilité structurelle et au décalage de son poids moléculaire vers environ 110 kDa (la forme glycosylée mature), bien que la protéine cœur prédite soit d'environ 37 kDa.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes, qui peuvent avoir des fonctions ou des modèles d'expression distincts.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène (protéine recombinante correspondant aux acides aminés 16-200) cible la région extracellulaire N-terminale ; l'anticorps peut reconnaître à la fois la protéine cœur et la forme glycosylée mature.
• Pour le Western blot (WB), il est conseillé de tester à la fois les conditions réductrices et non réductrices, et de noter que la bande observée peut migrer entre 37 kDa (protéine cœur) et 110 kDa (forme glycosylée), en fonction de l'échantillon et des conditions expérimentales.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), attendez-vous à un motif de coloration cohérent avec les endosomes, les lysosomes et la membrane cellulaire ; les protocoles de fixation et de perméabilisation doivent être optimisés pour le type cellulaire.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter des conditions de revêtement et de blocage appropriées ; envisagez de coupler avec un anticorps de détection approprié pour les dosages sandwich.
• Validez l'anticorps dans les espèces pertinentes (humain, souris, rat) et avec des échantillons de témoins positifs appropriés, tels que des lignées cellulaires de macrophages (par exemple, THP-1, RAW 264.7) ou des cellules mononucléaires du sang périphérique.

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